酪氨酸酶相关蛋白—2(TRP—2)是酪氨酸酶蛋白家族的重要成员，它在黑素合成过程中催化特异的反应，具有多巴色素异构酶活性，可以将红色化合物多巴色素异构为无色的优黑素中间介质—5、6二羟基吲哚-2-羧酸(DHICA)；它与白癜风的病理机制密切相关，并且与酪氨酸酶存在着交叉抗原，是近年来备受关注的黑素细胞抗原。确定其抗原表位对于深入研究该抗原及临床应用具有极其重要的意义，为了给TRP—2抗原表位确定的研究打下基础，本研究克隆了人TRP—2编码基因并表达了TRP—2蛋白。 我们通过RT—PCR的方法扩增TRP—2编码基因，克隆至pUC19载体并测序，再亚克隆至GST融合表达载体pGEX—4T—1，转化大肠杆菌，IPTG诱导表达了GST/TRP—2融合蛋白，并分析鉴定表达蛋白的可溶性，最后 第四军医大学硕士学位论文 一 用谷氨酚胺树脂柱纯化表达的蛋白。 试验结果表明：我们从培养的人黑素细胞中扩增出编码TRP—2的 CDNA序列，序列测定证实与文献报道的序列一致；成功构建了GST融合 表达载体 pGEX—4T—l／TRP—2；表达T GST／TRP—2融合蛋白；得到了 纯化的GST／TRP—2融合蛋白。我们的工作为进一步探索人TRP—2的抗 原表位及白癫风的发病机制和治疗打下了基础。