论文部分内容阅读
秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)属于线形动物门、线虫纲动物。它生活在世界各地的泥土中,以细菌为食,容易人工养殖,对人、动物和植物没有危害。秀丽隐杆线虫非常小,成虫只有1mm左右。从一个受精卵开始,经过细胞分裂、增殖,最后形成较复杂的组织和器官系统,如皮肤、肌肉、消化、神经、繁殖等。秀丽隐杆线虫还能感知气味和味道,对光线、温度有反应。它通身透明,在发育过程中,很容易在显微镜下对细胞和组织进行跟踪观察。线虫也是一种多细胞生物,这就意味着它也要经历一个复杂的发育过程,包括胚胎发生以及发育到成虫。这样,从秀丽新杆线虫得到的生物学知识可以直接应用于更加复杂的生物,包括人类自身。目前,秀丽隐杆线虫已作为一种模式生物在医学、药学、遗传学、环境科学等领域有了广泛的应用。本文利用秀丽隐杆线虫作为模式尘物,对雄黄微生物浸出液的抗菌活性,抗肿瘤活性和毒性做了系统的研究。结果表明,雄黄浸出液存在一定的抗菌和抗肿瘤活性,但也有较大的毒性。感染粪肠球菌的秀丽隐杆线虫glp-4(bn2)I;sek-1(km4)x突变株和空白未感染组比较,感染线虫组从第四天开始死亡率明显高于空白组。随着培养时间的延长,秀丽隐杆线虫肠内定殖的粪肠球菌克隆数也随之增加。阳性对照组100μg/ml的四环素可以抑制粪肠球菌在秀丽隐杆线虫体内的繁殖;高浓度和中浓度的雄黄浸出液能够有效抑制粪肠球菌在感染线虫体内的繁殖,但未能够延长线虫的存活时间。低浓度的雄黄微生物浸出液未能有效地抑制秀丽隐杆线虫体内粪肠球菌的繁殖。ras基因的活力过度激活型突变属于人类肿瘤细胞中最为常见的基因突变类型之一,秀丽隐杆线虫中与之相对应的let60过度表达可致线虫假阴门表型。雄黄浸出液对这一表型有明显的抑制和选择性。含有6.40μg/ml砷的雄黄浸出液对MT2124突变体线虫的假阴门表型有明显的抑制作用,其野生型比例高于空白组60%,雄黄浸出液对let60所致的多阴门表型有明显的抑制作用,为在ras通路上抗肿瘤药物的筛选提供了一个突破口。在雄黄浸出液的毒性研究中,本实验应用秀丽隐杆线虫作为模式尘物对雄黄浸出液的毒性进行评价,结果显示,相同浓度的雄黄浸出液,使得不同株系的秀丽隐杆线虫死亡一半的时间由7-12小时不等,所以不同株系的秀丽隐杆线虫线虫,对雄黄浸出液的敏感程度不同。秀丽隐杆线虫可以作为指示生物用于雄黄浸出液的毒性的检测。