克氏原螯虾(Procambarus clarkii)又叫淡水小龙虾,是我国重要的水产经济动物,同时也是是一种比较好的研究甲壳纲动物先天免疫的实验动物。在克氏原螯虾中,发现了很多免疫相关的基因,包括模式识别受体及免疫效应分子等。C-型凝集素是一类钙依赖型糖结合蛋白超家族。它们在先天免疫中作为模式识别受体发挥作用,并具有其他多种功能。为了更深入的了解C-型凝集素在克氏原螯虾中的功能多样性,我们对其凝集素进行了表达与功能研究。通过对克氏原螯虾血细胞cDNA文库进行随机测序并利用BLAST进行比对,得到了一个C-型凝集素的cDNA,我们把它命名为PcLec5。该cDNA序列全长为771bp,其中开放阅读框为516bp,编码一个含有171个氨基酸的蛋白。除此之外,5’和3’的非编码区分别为20和235bp。PcLec5含有一个17个氨基酸的信号肽,说明其是一个分泌型蛋白。Smart分析表明其含有一个CTLD结构域,其结构域共含135个氨基酸。通过半定量RT-PCR分析,PcLec5的mRNA在肝胰腺中特异存在,且含量较高。为了研究PcLec5的可能的功能,我们分别用鳗弧菌和金黄色葡萄球菌刺激螯虾,利用实时定量PCR检测了PcLec5在刺激后的表达模式。我们发现,在受到鳗弧菌刺激后,PcLec5的表达水平迅速提高,在刺激后12小时达到顶峰,之后逐步下降；在受到金黄色葡萄球菌刺激后,表达缓慢上升,在48小时升至最高,之后恢复至正常水平,这种变化表明PcLec5可能参与了先天免疫反应。我们通过PCR扩增得到PcLec5的成熟肽cDNA序列,将其与pET30a (+)载体连接,转化DH5α细胞,筛选到的阳性克隆培养后提取质粒,再转化表达菌株BL21 (DE3),诱导表达重组蛋白进行纯化,得到了PcLec5的重组蛋白。经细菌结合实验表明,rPcLec5可以与实验所用的多种细菌(包括革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌)结合,提示可能起到模式识别受体的功能。