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卵泡囊肿是母猪常见的繁殖障碍性疾病之一,会导致母猪不孕。它会引起母畜持续、频繁、短暂和无规律的发情,该病对猪饲养产业的发展造成了巨大的阻碍。现阶段,随着分子生物学的研究愈加深入,寻找猪卵泡囊肿标记基因的研究也越来越受重视。ESR、FSHβ和Leptin基因均可以通过调控下丘脑-垂体-卵巢轴的每个环节从而对母猪卵巢生长发育起到重要的作用。ESR(雌激素受体)是类固醇受体家族的成员之一,它能够调控雌性哺乳动物的生殖活动,影响雌性动物性腺组织基因的表达和调控,进一步影响动物个体的第二性征,繁殖周期,生殖力,妊娠维持等。有研究结果表明猪ESR基因PvuⅡ多态性酶切位点对猪的产仔数和繁殖性状有显著影响。然而目前尚无关于分析该位点与卵泡囊肿关系的报道。FSH(卵泡刺激素)是一种糖蛋白类促性腺激素,对促进颗粒细胞成熟有重要的作用。猪的FSH基因结构包含一长度为292bp的逆转座子,由于逆转座子的插入而导致了该基因位点存在多态性。经过对该位点的分析发现,FSHβ基因是影响猪繁殖性状的主效基因。但是目前尚无研究把FSHβ基因作为侯选基因来分析其与卵泡囊肿的关系。Leptin(瘦素)是由脂肪细胞分泌的一类蛋白质类激素,其基因表达产物主要参与动物生长发育和繁殖功能等方面的调节。有研究表明,猪leptin基因第3外显子T3469C位点变异对猪的繁殖性能具有一定影响。然而,尚无研究将Leptin基因作为侯选基因来分析其与卵泡囊肿的关系。本实验以雌激素受体(ESR)、促卵泡素β亚基(FSHβ)和瘦素(Leptin)作为研究对象。收集健康卵巢和患病卵巢后,通过提取卵巢基因组DNA,然后采用直接电泳法和PCR-RFLP法对雌激素受体(ESR)、促卵泡素β亚基(FSHβ)和瘦素(Leptin)进行基因多态位点检测,并进一步分析该位点与卵泡囊肿的关系,寻找与卵泡囊肿有关的分子标记。主要内容如下:(1)基因多态性检测结果显示:3个基因共检测到4个多态位点,分别是位于ESR基因内含子A>G突变;位于FSHβ基因内含子5’调控区T>C突变;位于FSHβ基因内含子C>T突变;位于leptin基因外显子T>C突变。(2)多态信息含量、杂合度和有效等位基因分析结果显示:ESR PvuⅡ多态酶切位点在两群体中均呈现中度多态(0.25<PIC<0.5),该多态位点基因型分布在囊肿群体中背离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05),在健康猪群体中符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05);FSHβ5’调控区多态位点在卵泡囊肿猪群体中呈现低度多态(PIC<0.25),健康猪群体中均呈现中度多态(0.25<PIC<0.5)。该多态位点基因型分布两群体中均背离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05);FSHβ-HaeⅢ多态酶切位点在两群体中均呈现低度多态(PIC<0.25),多态水平较低。该多态位点基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);Leptin基因Hinf I酶切位点在两群体中均处于低度多态(PIC<0.25),多态水平较低。该多态位点基因型分布在卵泡囊肿群体符合Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),在健康猪群体背离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05)。(3)利用分析软件对ESR、FSHβ和Leptin的基因型分布进行分析,结果表明ESR的AA和AB基因型在健康群体和卵泡囊肿群体分布差异显著(p<0.05),与卵泡囊肿的形成有关;FSHβ基因和leptin基因的基因型分布在本检测群体中均未见显著差异(p>0.05),与卵泡囊肿的形成无关。ESR基因可作为卵泡囊肿筛选的标志基因,为研发提高母猪繁殖力的新技术奠定基础。