基于多巴胺和α-葡萄糖苷酶功能化磁性材料的小分子靶向分析

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gy13006467077
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来,磁性纳米材料具有顺磁性、大比表面积、低毒性和表面易修饰等优点受到各研究领域的欢迎,广泛应用于医药生化分析、环境保护、食品安全及生物成像等领域。功能化磁性材料作为固相萃取吸附剂在复杂混合体系中可特异性吸附一些活性小分子,其中多巴胺和酶是两种热门修饰磁性材料的物质,前者修饰的磁性材料表面具有丰富的氨基和羟基功能基团且具有良好的π-π共轭体系,后者常用于植物提取液等复杂体系中筛选活性化合物。本论文从两个方面入手,一方面利用多巴胺修饰磁性碳纳米管富集检测赭曲霉素A,本方法相较于其它传统分离方法,具有快速、方便、绿色和高效的特点;另一方面,将α葡萄糖苷酶固定在磁性纳米颗粒上,特异性吸附芦荟中与其亲和的活性化合物,获得了一个新二氢异香豆素类化合物。  本学位论文由三章组成,第一章报道了多巴胺功能化磁性多壁碳纳米管快速富集检测赭曲霉素A,第二部分撰写了α葡萄糖苷酶功能化磁性纳米颗粒筛选芦荟中特异性亲和的化合物,第三章综述了磁性纳米材料在小分子分离分析中的研究,具体内容如下:  第一章为多巴胺功能化磁性碳纳米管富集检测赭曲霉素A。赭曲霉素A是曲霉属和青霉属等菌种产生的有毒代谢产物,因其污染广泛、毒性最大而受到重视,因此开发一种快速检测赭曲霉素A的方法是十分有意义的。首先合成了多巴胺修饰的磁性多壁碳纳米管(PD-mCNTs),通过透射电子显微镜(TEM),振动试样磁强计(VSM),X射线光电子能谱(XPS)和电化学循环伏安法(CV)等方法对PD-mCNTs进行了表征。然后将它磁性固相萃取吸附剂来富集检测赭曲霉素A,用HPLC-FLD对赭曲霉素A进行检测,保留时间为3min,峰形明显无杂峰。然后优化了萃取溶剂、萃取溶剂pH、萃取时间、吸附剂用量、洗脱溶剂和洗脱时间。在最优条件下,线性范围为0.1-2.0ng/mL,回收率为91.83%-104.59%,检测限为0.07ng/mL,定量限为0.21ng/mL,日内精确度为3.2%-4.6%,日间精确度为4.5%-5.6%,在真实样品红酒中加样回收率为95.65%-100.65%。  第二章为α-葡萄糖苷酶功能化磁珠筛选芦荟中的亲和活性成分。芦荟是一种常见药食两用的植物,在全球,它被用来治疗各种疾病,但关于芦荟的降糖效果一直众说纷纭。α-葡萄糖苷酶是控制饭后血糖的关键酶,抑制该糖能达到降糖的目的。近年来,一种将酶固定在磁性材料表面,来筛选复杂的中药提取液中与该酶有亲和活性的物质的方法,由于其具有方便、快速、高效等优点受到广泛关注。因此应用这一方法来研究芦荟是否具有降糖活性是十分有意义的一项工作。首先通过酰胺键将α-葡萄糖苷酶固定在醛基功能化磁珠的表面。采用傅里叶红外光谱(FT-IR)、电化学循环伏安法(CV)和电化学差分脉冲伏安法(DPV)来表征以证实α-葡萄糖苷酶被成功固定在磁珠表面。将其于芦荟提取液孵育一段时间,再外加磁场下分离吸附剂和溶液,将吸附剂上的活性化合物洗脱下来,经高效液相-质谱联用(HPLC-MS)确定三个化合物分子量,通过柱层析分离三个化合物,再通过质谱和相关文献报道,确认三个化合物是芦荟芋苷元、芦荟苷A和一个新化合物。然后通过1H NMR、13C NMR、DEPT90°、DEPT135°、HSQC和HMBC确认该新化合物为二氢异香豆素-2”香豆酰酯。最后通过体外活性测试表明芦荟于α-葡萄糖苷酶有亲和活性的化合物,芦荟苷A有α-葡萄糖苷酶抑制活性,芦荟芋苷元和二氢异香豆素-2”香豆酰酯有α-葡萄糖苷酶激动活性,且芦荟芋苷元激动活性较强。从芦荟中α-葡萄糖苷酶有亲和活性的化合物来看,芦荟降糖效果较弱。  第三章综述了功能化磁性纳米材料在小分子分析中的应用。
其他文献
学位
目的:探讨腭裂患儿的围手术期护理措施及重点.方法:通过查阅文献并结合实际工作情况探讨对腭裂患儿的术前、术中及术后的护理方法.结果:术前对于患儿及其家长的安抚、术前准
目的:实验将针对脑卒中患者进行人性化护理,进一步预防下肢静脉血栓的发生,提升护理疗效.方法:实验选取了2018年1月~2019年12月收治的脑卒中患者作为研究的对象.通过回顾式分
目的:研讨优质服务理念在牙体牙髓科护理工作中的应用及效果.方法:从我院牙体牙髓科2017年10月-2019年10月收治的患者中抽取100例作为观察对象,按诊疗时间先后纳入两组,A组(n
目的:分析对产妇分娩采取助产士一对一全程陪伴分娩人性化护理的临床效果.方法:选择2016年1月-2019年10月间于本院产科就诊分娩的100例产妇为对象,依据信封法分为对照组及观
目的:讨论希望护理对烧伤整形患者满意度及焦虑抑郁评分的影响.方法:将86例于2016年8月-2020年4月期间本院收治的烧伤整形患者随机分为对照组(常规护理)与研究组(对照组基础
目的:采用D2O交换法,应用微波合成仪,通过简单方便的实验步骤对新生儿氨基酸代谢异常中常见的10种氨基酸进行氘代合成,采用核磁共振方法检测氘代率,并将合成的氘代氨基酸作为新生
目的:  双黄连中药注射剂所致的不良反应目前主要归结为过敏反应,常采用肾上腺素等来进行救治。本课题组前期研究表明,双黄连中药注射剂可致缓慢性心律失常,而肾上腺素具有正
一植物远缘杂交对其物种进化具有重要的作用和意义。据考古、分类、遗传学等方面文献记载及人工合成异源六倍体证实,我们目前生产栽培的普通小麦(T.aestivim)的进化过程就是
目的:研究精神障碍无抽搐电休克治疗的不良反应及护理对策.方法:2018年4月-2020年3月本院接诊的精神障碍病患50例,对其施以无抽搐电休克治疗.统计不良反应发生例数,总结护理