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目的1.比较两种培养基对SD新生鼠大脑皮层神经干细胞（neural stem cells,NSCs）增殖的影响,以改良培养方法。2.观察黄芪总皂甙（total saponins of Astragalus,TSA）调控外源性NSCs向神经元方向分化的作用及其有效浓度,并研究该作用与Wnt/β-catenin信号通路相关机制。方法1.分离SD新生鼠大脑皮层细胞后,设立对照组采用Neural basal+B-27培养与实验组采用DMEM/F12+B-27+EGF+bFGF培养,倒置显微镜观察原代细胞形态。选取各组第三代细胞,用CCK-8统计细胞早期增殖情况,免疫荧光统计传代期神经球数量。诱导实验组细胞分化,免疫荧光鉴定分化细胞形态。2.SD新生鼠大脑皮层来源NSCs进行原代、传代培养并鉴定,通过CCK-8试剂盒初筛TSA诱导分化的可能有效浓度。取第三代NSCs,设不加TSA的正常组和不同浓度TSA实验组,分化培养7d后,间接免疫荧光法和Western blotting检测MAP-2（神经元特异性蛋白）和GFAP（星形胶质细胞特异性蛋白）表达。另设正常组、最佳浓度TSA组、TSA+Wnt/β-catenin信号通路抑制剂ICG-001组和ICG-001组,分化培养7 d后,Western blotting检测各组Wnt3/3a、β-catenin和抗神经原素1（Ngn1）蛋白表达。结果1.相较对照组,实验组细胞形态更接近典型神经球。细胞增殖早期,实验组细胞数量明显多于对照组（P<0.05）。细胞传代期,实验组神经球数量明显多于对照组（P<0.05）。实验组细胞具备分化为神经元与胶质细胞能力,并可被清晰标记。2.TSA浓度在1×10-4mmol/mL、1×10-5mmol/mL、1×10-6mmol/mL时,对NSCs数量具有正向影响（P<0.05）,可作为后续分化实验组浓度。TSA能增加NSCs分化为神经元的比例,1×10-5mmol/mL最佳（P<0.05）。TSA能上调Wnt3/3a、β-catenin与Ngn1蛋白的表达（P<0.05）。结论1.DMEM/F12+B-27+EGF+bFGF培养基相较Neural basal+B-27培养基更能促进新生SD大鼠NSCs增殖。该方式培养的NSCs具备分化能力。2.TSA能促进外源性NSCs向神经元方向分化,可能与激活Wnt/β-catenin信号通路,从而调控该通路下游促分化靶向蛋白Ngn1的表达有关。TSA最佳促神经元方向分化浓度约为1×10-5mmol/mL。