腹内脂肪及神及调节蛋白4(Nrg4)表达变化在胃旁路术治疗2型糖尿病合并肥胖中的作用研究

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研究背景减重代谢手术是目前治疗2型糖尿病合并肥胖的有效手段,其中胃旁路术(Roux-en-Y gastric bypass,RYGB)疗效最为显著,但目前手术对我国患者的中长期疗效以及疗效影响因素尚不明确,有待进一步探索。研究目的明确胃旁路术治疗2型糖尿病合并肥胖的中期手术疗效,通过探索疗效预测因子,筛选差异基因,为手术治疗2型糖尿病机制研究提供实验基础。研究方法第一部分:临床研究回顾性分析170例接受胃旁路术(RYGB)的2型糖尿病合并肥胖患者,分析胃旁路术治疗2型糖尿病的中期疗效,探索术前疗效预测因子。第二部分:动物实验通过建立喂养型2型糖尿病合并肥胖SD大鼠模型,实施不同减重代谢术式,比较不同术式对2型糖尿病疗效;通过对大鼠腹内脂肪进行转录组测序,寻找差异基因;通过qPCR扩大试验验证特定差异基因的表达变化与手术疗效、胰岛功能的关系。研究结果第一部分:临床研究共167例(98.2%)患者完成随访研究。女性占比53.9%,糖尿病平均病程为7.1±4.9年。术前合并高血压和(或)血脂异常患者分别占48.5%及44.9%。基线平均BMI为31.43±3.56kg/m2。术后代谢紊乱相关用药量显著下降,糖尿病疗效术后第一年最佳。术后3年糖尿病完全缓解患者113例(67.7%)。糖尿病病程、空腹血清C肽、腹内脂肪面积为RYGB术后糖尿病缓解的预测指标,当术前糖尿病病程<5.5年,空腹C肽>2.54 ng/ml,腹内脂肪面积>110.25 cm2,则倾向于糖尿病缓解。对临床患者术后3年血清Nrg4水平检测结果显示,术后缓解组Nrg4含量显著高于未缓解组,且与糖化血红蛋白(A1c),餐后血糖,r谷氨酰转移酶(rGT)以及糖化血清白蛋白水平显著相关。第二部分:动物实验大鼠整体造模成功率为77.2%(44/57例),RYGB对降低体重、改善血糖以及胰岛素分泌的效应显著;对腹内脂肪进行检测,RNAseq结果显示RYGB组对比对照组,在糖脂代谢、内分泌代谢疾病相关基因的表达间存在大量差异;而对比Sham组,主要差异性表达存在于信号分子间相互作用、信号转导以及内分泌系统相关基因。对差异基因qPCR结果显示神经调节蛋白4(Neuroregulin 4,Nrg4)在RYGB组高表达,且与脂联素以及胰腺十二指肠同源框1(Pancreatic Duodenal Homeobox-1,PDX-1)表达量正相关。结论RYGB能显著改善2型糖尿病及相关代谢紊乱。术前空腹C肽水平,糖尿病病程以及腹内脂肪面积是判断RYGB中期疗效的预测因子。RYGB术后腹内脂肪Nrg4特异性高表达。且与胰腺PDX-1表达以及胰岛β细胞功能改善正相关。Nrg4可能是参与手术治疗2型糖尿病机制的重要基因。
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