氨肽酶底物的合成与应用

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人类进入21世纪以来,感染性疾患仍然是危害人类健康的重要疾患,尤其是在第三世界国家。而且随着人们生活水平的提高,各种安全问题也越来越得到人们的重视,微生物的污染问题当然也得到了相应的关注。在食品和环境等方面都存在微生物污染的问题,近年来环境污染的加剧和生态平衡的不断破坏,导致感染的致病菌的种类越来越多,病原微生物对人类的危害也越来越大了,同时常见致病微生物的威胁不但没有消除,反而更是出现了严重的耐药问题,如葡萄球菌、肠球菌、大肠杆菌、念珠菌等,给临床治疗带来巨大困难。传统的微生物检测方法,主要包括形态检查和生化方法,其准确性,灵敏性都较高,但是涉及的实验较多,操作复杂,时间较长,准备和收尾工作繁琐,而且需要有大量的人员参与,因此快速的检测细菌的方法迫切需要建立起来,其中一种有效快速的方法是利用一些已经发现的某些具有特征性的酶,应用适当的底物来迅速完成细菌鉴定。酶检测法有着操作简便、灵敏、特异,检测时间短的优点,但该法作为常规检测成本较大,主要原因是由于现有色素和荧光底物种类较少且生产工艺复杂、合成步骤长,产率低,迫切需求出现更多种类且价格低廉的酶底物来解决这些问题。在生物化学中,酶底物是非常有用的工具。本文就是在氨基酸分子中引入荧光基团合成氨肽酶底物,若该微生物中存在水解该底物的酶,在微生物代谢后,其中的荧光基团就会表现出荧光,从而实现快速准确的检测。本文所使用的荧光基团是7-氨基香豆素类,主要有7-氨基-4-甲基香豆素,7-氨基-4-三氟甲基香豆素。
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