神农香菊(Dendranthema indicum var.aromaticum)遗传转化体系的建立及其叶片表皮毛初步研究

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神农香菊(Dendranthema indicum var. aromaticum)为我国特有物种,以其在菊科植物中罕见的浓郁香气、精油中高效的抗菌及抗氧化活性,自其被发现以来,一直受到各方学者的广泛关注和研究。本研究通过人为调节不同培养基组分、生物调节剂浓度,初步建立神农香菊的遗传转化体系,为神农香菊香味基因的表达研究及品种改良工作奠定理论基础。同时对神农香菊表皮毛的结构、密度及腺毛分泌物进行了初步研究,以期为神农香菊致香机理的研究打下良好基础。主要研究成果如下:(1)建立了神农香菊遗传转化受体系统。神农香菊不定芽诱导以MS为基本培养基,在附加6-BA1.0mg/L+NAA1.0mg/L培养基上诱导效果最佳。神农香菊遗传转化的卡那霉素最适分化临界耐受浓度为45mg/L,最适生根临界耐受浓度为60mg/L。头孢霉素抑菌浓度在延迟培养阶段选用200mg/L最佳,筛选培养阶段选用100mg/L最佳。(2)初步建立了神农香菊遗传转化体系。用神农香菊无菌苗叶盘为侵染材料,用农杆菌EHA105进行侵染。在预培养3d,侵染时间30min,共培养3d,延迟培养3d的.转化体系下,转化率最高,为神农香菊叶盘最优遗传转化体系。供试外植体共计1520个,获得转化植株19株,转化率为1.25%。PCR检测结果显示外源DNA已初步整合到神农香菊植株基因组中。(3)对神农香菊表皮毛进行了初步研究。显微镜观察结果显示神农香菊叶片表皮毛密度的分布特点为:幼叶大于成熟叶;下表皮大于上表皮;一级叶脉处大于二级叶脉处大于叶边缘。表皮毛类型主要为单列毛和T型毛两种。GC-MS分析结果显示神农香菊叶片腺毛分泌物的主要成分为烩烯、桉叶油醇、β-侧柏醇、樟脑、揽香烯和a-红没药烯。其中萜烯类占鉴定总成分的22.29%、醇类占31.43%、酸类占11.56%,除此之外还包括7.05%的苯类和6.53%的烷类。
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