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目的检测雌激素受体ERα、ERp和GPR30在小鼠结肠腺癌细胞系MCA-38中的表达,研究雌激素(E2)影响MCA-38细胞增殖的作用机制,探讨雌二醇(E2)对小鼠结肠腺癌细胞系MCA-38细胞增殖与凋亡及雌激素受体(ER)表达变化的作用与机制,进一步分析不同雌激素受体亚型可能介导的雌激素对结直肠癌细胞的作用特点。方法采用RT-PCR和Western Blot检测MCA-38细胞ERα、ERβ、GPR30 mRNA及蛋白表达情况,经不同浓度E2和E2-BSA(0、0.01nM、0.1nM、1nM、10nM、100nM)作用于MCA-38细胞24h后应用MTT法检测细胞增殖情况,比较E2组和E2-BSA组细胞增殖差异,分析雌激素对细胞增殖影响途径为基因组机制或非基因组机制。使用Western blot法检测各组肿瘤细胞E2处理前后ERa和ERβ以及caspase-3表达变化,分析细胞凋亡情况差异以及雌激素受体不同亚型表达变化,分析不同雌激素受体亚型在结直肠癌细胞增殖凋亡方面作用的可能机制。两样本均数比较采用t检验,多个均数之间两两比较采用q检验,P<0.05认为差异有统计学意义。结果(1)MCA-38细胞表达ERα、ERβ、GPR30,其中ERp表达量最高；(2)生理浓度的E2(0.1nM-10nM)促MCA-38细胞增殖作用最为明显,0.01nM、0.0nM、1.0nM、10nM浓度E2使MCA-38细胞数目分别增加了20.47%、25.29%、37.59%和30.95%(P<0.05),而E2-BSA组与对照组比较,无明显促增殖作用；(3)不同剂量的E2均影响ERa和ERβ表达,E2上调ERa蛋白表达,0.01nM、0.1nM、1nM浓度范围的E2作用最明显,与对照组相比分别使ERa蛋白表达量增加了4.7%、5.5%和5.9%(P<0.05)。E2则使ERp表达下降,0.1nM, 1nM组最明显,分别使ERp蛋白表达量下降了10.2%和3.9%(P<0.05)；(4)经E2处理,MCA-38细胞的caspase-3蛋白表达量明显下降,其中以0.1nM和1nM组最为明显,分别降低20.2%和32.9%(P<0.051。结论(1)生理浓度的E2对MCA-38细胞有明显的促增殖作用,该作用为E2通过核受体途径实现,而与雌激素膜受体无关。(2)E2对MCA-38细胞的ERα和ERβ表达、细胞增殖及凋亡均产生影响,MCA-38细胞增殖和凋亡分别与ERα和ERβ表达变化密切相关。