目的：肝细胞癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，恶性程度高，易早期发生转移，而且虽采用手术或介入等综合治疗后复发率仍较高，其原因与肝细胞癌易侵袭转移的生物学特性有关。研究表明，肝癌细胞的运动、侵袭和转移特性直接与肿瘤组织中HPA的高水平表达有关。明确HPA的表达与分泌机制和探索有效的治疗方法依然是临床研究的一大挑战。乙酰肝素酶(HPA)是一种葡萄糖醛酸内切酶，在包括肝癌在内的多种恶性肿瘤中普遍高表达，也是目前发现的唯一可以降解硫酸乙酰肝素(HS)活性的酶，它通过切断硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)的HS侧链，而降解细胞外基质(ECM)和血管基底膜(BM)释放活性物质，产生链式反应，加快血管生成，通过多种途径直接、间接促进肿瘤生长和侵袭转移。研究表明，肝癌细胞内存在Ca<2+>库依赖的Ca<2+>内流，是NO→cGMP敏感的(负性调控)Ca<2+>信号调控通路，而细胞内稳定的高Ca<2+>水平可明显增强肝癌细胞体外侵袭粘附的能力。本实验将细胞内Ca<2+>调控通路引入HPA的表达与分泌过程，探讨Ca<2+>在HPA的表达与分泌过程中发挥的作用，可为进一步探讨抑制肝癌侵袭和转移的治疗方法提供可靠的实验依据和理论基础。 方法：肝癌细胞株SMMC-7721分对照组和试验组。对照组细胞常规培养，试验组细胞分别在培养体系中引入Ca<2+>及其激动剂毒胡萝卜内酯(TG)和TG抑制剂S-亚硝基-乙酰青霉胺(SNAP)干预，按时收获细胞。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术，测定细胞HPA mRNA含量，以β-actin作为内参照标准，对扩增产物通过凝胶扫描仪进行DNA电泳条带的密度值分析，将HPA与β-actin比值作为HPA 表达水平的参数，对HPA产物进行相对定量；以Western blot方法检测SMMC-7721细胞内以及培养上清中HPA 蛋白表达的变化，并进行相对定量分析。数据采用SPSS 12.0统计分析软件进行分析。 结论： 1.肝癌细胞内Ca<2+>在mRNA水平对HPA的表达没有影响，在蛋白水平可有效的诱导肝癌细胞合成并分泌HPA。 2.肝癌细胞内Ca<2+>库释放诱导剂毒胡萝卜内酯(TG)可明显诱导HPA蛋白的表达与分泌；而抑制剂S-亚硝基-乙酰青霉胺(SNAP)则抑制了TG的诱导作用。 3.肝癌细胞内Ca<2+>通过细胞内NO→cGMP调控的Ca<2+>信号通路在蛋白水平增强了HPA的表达和分泌，进而降解细胞外基质(ECM)和血管基底膜(BM)，诱导血管新生，促进肿瘤细胞的侵袭和转移过程。