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本文对荧光光谱分析法在违法添加物和可能滥用的添加剂的分析领域的研究成果进行了总结,介绍了该分析方法在理论与应用研究方面的重要成就。本文用荧光光谱法对食品中几种食品违禁添加剂——溴酸钾、孔雀石绿、苏丹红Ⅱ、Cr(Ⅵ)的测定方法进行了深入研究,并建立了一系列新的检测方法。实验结果表明,荧光光谱分析法用于食品违禁添加剂分析有着广泛的前景。
本文利用恒波长同步荧光淬灭法测定饮用水中的微量溴酸根。在盐酸介质中,△λ=20 nm,溴酸根对罗丹明123的恒波长同步荧光有淬灭作用,且淬灭程度与溴酸根的含量呈线性关系,线性范围为0~200μg/L,检出限为3.00ng/mL。该方法成功地用于化学试剂和各种饮用水中溴酸盐含量的测定。
本文实验以溴酸钾氧化过量的KI生成I3-,I3-与孔雀石绿(MG)结合形成缔合微粒,致使体系的共振散射强度急剧增强。孔雀石绿的量与体系的共振散射光强度呈良好线性关系,线性回归方程为△I=4.796CBrO3-(μg/mL)+15.81,线性范围为0.1~12μg/mL,相关系数r=0.9964,检出限为15.6ng/mL。
本文运用荧光光谱分析法研究了苏丹红Ⅱ与硫酸奎宁的相互作用。实验表明,△λ=30 nm时,测得其线性回归方程为F=1.191×1010c(mol/L)+16.9,线性范围为1.0×10-6mol/L~5.0×10-4mol/L,相关系数r=0.997,检出限为2.393×10-11mol/L。该方法可以用于实际样品中苏丹红Ⅱ的检测。
此外,应用荧光光谱分析法研究了苏丹红Ⅱ与BSA的相互作用。通过Stern-Volmer方程,Lineweaver-BurK方程和双倒数曲线进行计算,研究了苏丹红Ⅱ对BSA内源荧光淬灭的机制,得到淬灭机制主要为静态淬灭。测定了不同温度下的淬灭常数,确定了苏丹红Ⅱ与BSA结合位点数位为1。通过测定278K和288K时的结合常数,计算了苏丹红Ⅱ与BSA作用的热力学参数,并以此确定了苏丹红Ⅱ与BSA主要通过静电力进行作用。同步荧光和三维荧光研究表明,苏丹红Ⅱ使BSA的结构发生改变,色氨酸残基所处微环境的极性减小。
本文通过Stern-Volmer方程,Lineweaver-BurK方程和双倒数曲线进行计算,研究了Cr(Ⅵ)与胰蛋白酶之间相互作用的荧光淬灭机理,得到Cr(Ⅵ)对胰蛋白酶内源荧光的淬灭机制主要为静态淬灭。测定了Cr(Ⅵ)对胰蛋白酶的淬灭常数和扩散常数(288K),确定了Cr(Ⅵ)与胰蛋白酶结合位点数位1。通过测定278K和288K时的结合常数,计算了Cr(Ⅵ)与胰蛋白酶作用的热力学参数,并以此确定了Cr(Ⅵ)与胰蛋白酶主要通过静电力进行作用。同步荧光和三维荧光研究表明,Cr(Ⅵ)使胰蛋白酶的二级结构发生改变,色氨酸残基所处微环境的极性减小。