反刍动物的氮排泄不仅造成日粮中蛋白质的损失，还造成了环境污染，因此近年来有关如何降低反刍动物的氮排泄，提高日粮蛋白质的利用效率越来越受到关注。瘤胃高效产氨菌作为一种快速产氨的瘤胃细菌，在反刍动物瘤胃蛋白质分解和氮排泄过程中可能起着重要的作用，本研究建立了瘤胃高效产氨菌Real-timePCR检测方法，成功对瘤胃高效产氨菌进行定量，为今后研究日粮对高效产氨菌数量的影响奠定理论基础。同时还研究了酪蛋白水解物以及4种植物提取物对瘤胃体外发酵及瘤胃主要微生物数量的影响，初步探讨高效产氨菌的数量与瘤胃氨态氮生成的关系。　　试验一瘤胃中高效产氨菌绝对定量PCR方法的建立。本试验通过GenBank查找Clostridium aminophilum的16S rRNA序列，利用PRISE软件设计引物，PCR扩增后将产物送出测序，检测引物的特异性，通过GenBank上的BLAST将测序结果进行序列的同源性分析，结果发现Clostridium aminophilum的阳性克隆的测序与GenBank上已知目的菌种序列相似性为100％。通过厌氧培养、活化目的菌株、提取目的菌株的DNA成功建立了高效产氨菌（C.aminophilum）的Real-timePCR绝对定量方法，结果表明所制得的标准曲线具有很高的相关性(R2＞0.99)，扩增效率为96.45％，符合Real-time PCR定量的要求。以玉米和羊草(1∶1)0.5g为发酵底物，梯度添加酪蛋白水解物，三个重复，39℃体外发酵24h后检测瘤胃高效产氨菌的数量，结果显示，瘤胃高效产氨菌的数量随酪蛋白水解物的梯度添加而增加，所设计的引物可以用于后续试验样品中目的菌株的准确定量。　　试验二瘤胃中高效产氨菌检测方法在体外产气试验中的应用。本试验采用压力传感器式体外产气系统，以玉米和羊草(1∶1，DM)0.5g为发酵底物，梯度添加酪蛋白水解物，三个重复，39℃体外发酵24h后研究酪蛋白水解物对瘤胃发酵和瘤胃高效产氨菌的数量的影响。结果显示，瘤胃高效产氨菌的数量随酪蛋白水解物浓度的升高而增加。　　同时本试验采用压力传感器式体外产气系统，以玉米和羊草(1∶1，DM)0.5g为发酵底物，分别将薄荷油、百里香油、樟脑油和冬青油以300 mg/L的水平添加到体外发酵液中，添加12mg/L的莫能霉素钠作为正对照，空白对照添加相同体积的无水乙醇，三个重复，39℃体外发酵24h后研究植物提取物对瘤胃发酵和微生物菌群的影响。结果表明，冬青油处理组与空白对照相比显著提高了产气量（P＜0.01），薄荷油、百里香油和莫能霉素钠处理组与空白对照相比显著降低了产气量（P＜0.01），樟脑油处理组与空白对照相比对产气量无显著影响;薄荷油和百里香油处理组与空白对照相比显著降低了总VFA的浓度（P＜0.01），其他2种挥发油和莫能霉素钠处理组与空白对照相比对总VFA的浓度无显著影响;薄荷油、百里香油和莫能霉素钠处理组与空白对照相比显著降低了氨态氮的浓度(P＜0.01)，其他两种挥发油处理组与空白对照相比对氨态氮的浓度无显著影响;与空白对照相比，4种挥发油和莫能霉素钠都不影响瘤胃微生物蛋白的浓度;樟脑油处理组与空白对照相比显著提高了乙酸丙酸的比例（P＜0.01）。由试验结果得出，樟脑油相对于其它3种挥发油具有较好的添加效果。樟脑油可以改变瘤胃的发酵模式，从而促进日粮能量的利用。　　取上述体外产气试验瘤胃液样品1 mL，采用绝对定量的方法测定瘤胃液中总菌、真菌、普雷沃氏菌、高效产氨菌、嗜淀粉瘤胃杆菌、白色瘤胃球菌、黄色瘤胃球菌、产琥珀酸丝状杆菌的数量。结果显示，4种挥发油的添加对瘤胃总菌、瘤胃真菌、黄色瘤胃球菌和高效产氨菌的数量均未产生显著影响;薄荷油、百里香油和冬青油显著降低了普雷沃氏菌的数量(P＜0.05)，薄荷油、百里香油、樟脑油和冬青油显著降低了产琥珀酸丝状杆菌的数量(P＜0.01)，百里香油和冬青油显著降低了白色瘤胃球菌的数量(P＜0.05)，薄荷油、百里香油和冬青油显著降低了嗜淀粉瘤胃杆菌的数量(P＜0.01)。　　综上所述，薄荷油、百里香油和冬青油处理组纤维分解菌数量的显著降低与它们体外发酵试验产气量和总VFA浓度的显著降低呈对应关系;薄荷油和百里香油在显著降低了氨态氮的浓度的同时也抑制了普雷沃氏菌和嗜淀粉瘤胃杆菌的生长，但对高效产氨菌的数量并未产生显著影响。