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第一部分ELISA双抗体夹心法定量检测人血清MIC-1浓度的方法体系的建立与评估目的:建立酶联免疫吸附检测法(ELISA)定量检测人血清巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)浓度的方法体系,并评估其准确性、稳定性、重复性。方法:通过免疫反应将MIC-1标准品和人血清样本进行衍生化,生成可见光区可检测的免疫复合物。在450nm波长处运用可见光分光光度法测定该复合物的吸光度。以MIC-1标准品的浓度作为横坐标,以吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。根据血清样本的吸光度即可推算血清中的MIC-1浓度。用该方法对8份正常人和8份2型糖尿病患者的血清样本进行定量检测,通过批内差异系数、批间差异系数,加标回收率,线性范围等指标对该方法进行评估。结果:在线性范围7.813pg/mL～500pg/mL内,标准曲线相对系数均在0.990～0.999,批内差异系数1.89%～5.10%,批间差异系数5.93%～14.07%,加标回收率98.0%～101.6%。结论:该ELISA双抗体夹心法准确、稳定,重复性较好,可检测的线性范围较大,可用于人血清MIC-1浓度的定量检测。第二部分MIC-1与2型糖尿病相关性的初步研究目的:研究2型糖尿病患者血清MIC-1的水平特征,初步探讨MIC-1与2型糖尿病的相关性。方法:课题纳入51名正常人和49名2型糖尿病患者,测定身高、体重、腰围、血压、空腹血浆血糖、空腹血清胰岛素、血脂、糖化血红蛋白等。使用ELISA双抗体夹心法检测血清MIC-1浓度。结果:2型糖尿病组血清MIC-1浓度[中位数588.05 pg/mL,全距(158.90～2050.60) pg/mL]较对照组[中位数284.35 pg/mL,全距(64.40～1150.20) pg/mL]升高,P<0.001。单变量相关分析提示年龄、性别、BMI、腰围、臀围、收缩压、甘油三酯、空腹血糖等均与血清MIC-1浓度正相关。多元线性逐步回归分析提示年龄、空腹血糖、性别均与血清MIC-1独立相关。结论:2型糖尿病患者血清MIC-1水平较正常人显著升高。年龄、空腹血糖和性别是影响MIC-1水平的独立因素。