基于肾小管EMT和内质网应激诱导的细胞凋亡探究肾康注射液改善糖尿病肾小管病的临床疗效和作用机制

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yaqi007666
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[背景/目的]肾康注射液(SKI)是临床上治疗慢性肾脏病(CKD)的常用中药复方制剂。SKI用于治疗慢性肾衰竭不仅在临床中有实践应用,更有基础研究证实其有效性。此外,SKI与糖尿病常规基础治疗方案联合,可减少尿蛋白,改善肾功能,从而用于治疗早、中期糖尿病(DKD)患者。然而,目前尚无SKI直接干预DKD肾小管损伤临床疗效的报道。因此,对于一些伴有肾小管损伤的早、中期DKD患者,我们推测,SKI联合常规处理方式的治疗方案可改善肾功能,而且,能减轻肾小管损伤,延缓DKD进展。基于此,我们开展了单中心、小样本的SKI改善DKD患者肾小管损伤临床疗效的回顾性研究。[方法]收集G3b期DKD患者的病例资料共计40例,采用回顾性分析方法开展评估和研究。根据治疗措施不同,将全部患者分为两组:A组对照组,B组治疗组,每组20例。A组给予“常规基础治疗”的治疗措施;B组患者采取“常规基础治疗+SKI”的治疗措施。在患者接受上述治疗措施前,比较两组患者基线资料参数;再比较其在接受不同的治疗措施2周后的中医证候分级量化积分、常规生化指标、肾小管损伤指标以及安全性指标等。[结果]对于G3b期DKD患者,“常规基础治疗+SKI”能改善其中医证候,常规生化指标如Scr、BUN、UA、eGFR、CYS-C、RBP、UACR以及肾小管损伤指标如UNAG等得到改善;但是,对其血清TCO2、血清NO、血清RBP以及其它安全性生化指标,如ALT、RBC、AST、Hb等均无影响。[结论]我们发现,对于在本研究中所收集的40例G3b期DKD患者的病例资料,“常规基础治疗+SKI”能改善部分患者的中医证候分级量化积分、部分常规生化指标以及肾小管损伤指标。其中,与“常规基础治疗”相比,对于Scr、eGFR、UNAG、UACR、CYS-C的改善作用,“常规基础治疗+SKI”疗效更优。[背景/目的]研究表明,糖尿病肾小管病(DT)可能早于肾小球和微血管病变,并在糖尿病肾病(DKD)进展至终末期肾病的过程中发挥至关重要的作用。肾康注射液(SKI)是临床上治疗慢性肾病(CKD)的常用药物,但是,SKI是否能减轻DT仍不清楚。我们以探索新的DT治疗策略为目的,试图基于肾小管上皮细胞间充质转分化(EMT)和内质网应激(ERS)诱导的细胞凋亡来阐明SKI减轻DT的作用和深层机制,将其与罗格列酮(ROS)——临床上常用的胰岛素增敏剂相对比,进而,针对ERS相关的PERK-eIF2α-ATF4-CHOP信号通路来揭示SKI保护肾小管上皮细胞的分子靶点。[方法]采用“单侧肾切除法”、“高脂饲料喂养法”联合“腹腔注射链脲佐菌素(STZ)”制造动物模型,建立糖尿病肾病-肾小管病大鼠模型。实验大鼠分为4个组别,设置如下:正常组(每天2mL双蒸水喂养),DKD模型组(DKD造模不经其它处理,每天2mL双蒸水喂养)、SKI组(DKD造模后经SKI治疗,每天灌胃给予5g·kg-1的SKI溶液)和ROS组(DKD造模后经ROS处理,5 mg·kg-1的计量每天灌胃给予)。给药6周后,收集尿液、血液以及肾组织,检测各项指标。采集模型鼠疗效学指标、肾小管损伤指标、肾小管EMT指标、肾小管上皮细胞凋亡指标、肾小管ERS指标以及相关的PERK-eIF2α-ATF4-CHOP信号通路活性的影响。此外,在体外实验中,我们采用NRK-52E细胞,观察SKI和ROS对凋亡指标、ERS指标以及相关PERK-eIF2α-ATF4-CHOP信号通路活性的影响。[结果]借助基于DKD的DT大鼠模型和肾小管上皮细胞模型,我们阐明:①SKI和ROS能改善模型鼠的一般情况、肾脏形态和部分常规生化指标以及尿酶;②SKI和ROS能改善或抑制肾小管损伤和EMT;③SKI和ROS能减轻肾小管上皮细胞凋亡和ERS;④SKI和ROS能抑制PERK-eIF2α-ATF4-CHOP信号通路活性。[结论]SKI通过抑制肾小管EMT和ERS诱导的细胞凋亡而减轻DT,而且,SKI的作用与ROS相似。该发现将促进SKI在DT临床治疗领域的应用。
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