【摘 要】
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目的:1、在体外观察多西他赛对人食管癌细胞系EC-9706生长抑制的影响,初步探索多西他赛对细胞周期分布的影响及其作用机制。2、在体外观察多西他赛及X线联合作用对人食管癌细
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目的:1、在体外观察多西他赛对人食管癌细胞系EC-9706生长抑制的影响,初步探索多西他赛对细胞周期分布的影响及其作用机制。2、在体外观察多西他赛及X线联合作用对人食管癌细胞系EC-9706生长抑制的影响,探讨多西他赛的放射增敏作用及机制,为食管癌的放射增敏治疗提供新的思路和方法。3、通过RT-PCR检测照射后食管癌细胞系EC-9706Bcl-2基因的表达情况,探讨X线对细胞的生长抑制和诱导凋亡的机制。方法:1、用不同浓度的多西他赛处理食管癌细胞系EC-9706,以集落形成实验检测多西他赛对该细胞株的生长抑制作用。2、以0、0.25×10-9、0.5×10-9、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L的多西他赛处理细胞24h、48h、72h后以流式细胞仪法检测细胞周期分布。3、以10-6mol/L的多西他赛处理细胞24h,再以6MV-X线0、2Gy照射细胞,分别于照射后24h和48h以流式细胞仪法检测细胞细胞周期的分布。4、以6MV-X线0Gy、4Gy、6Gy作用于细胞,于1h、6h和24h分别提取细胞总RNA,以RT-PCR法检测细胞Bcl-2基因的表达。结果:1、多西他赛在体外能抑制EC-9706细胞的增殖,并呈浓度依赖性。多西他赛可以诱导EC-9706细胞凋亡和G2/M期阻滞。2、多西他赛可以使细胞周期阻滞在G2/M期,并呈现出时间-浓度依赖性。3、2GyX线照射可以解除由于多西他赛处理而引起的G2/M期细胞周期阻滞,并且具有时间依赖性。4、X线作用后,Bcl-2基因的表达急剧下降,但未见明显的剂量依赖性和时间依赖性。结论:1、多西他赛在体外对食管癌细胞有放射增敏作用。2、4Gy、6GyX线作用可使EC-9706细胞系Bcl-2表达显著下降。
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