磷脂酰丝氨酸具有较高的营养价值,并且可以预防多种疾病,当前被广泛应用到医疗保健、食品加工等行业。磷脂酰丝氨酸在自然界中的含量极低,且提取比较困难。本文以蛋白酶辅助提取蛋黄卵磷脂,利用磷脂酶D的催化特性,将卵磷脂催化合成磷脂酰丝氨酸;最后对磷脂酰丝氨酸进行分离纯化,从而获得高纯度的磷脂酰丝氨酸。本研究主要内容如下:(1)采用蛋白酶辅助提取鸭蛋黄卵磷脂。运用单因素和正交试验的方法优化提取工艺,考察酶添加量、乙醇浓度、料液比和提取温度等工艺条件对卵磷脂提取率的影响,并应用红外光谱(IR)对提取物进行检测分析。蛋白酶辅助提取鸭蛋黄卵磷脂优化工艺条件为:中性蛋白酶添加量为0.2g/100g蛋黄液,乙醇浓度95%,提取温度35℃,料液比为1:5(g/mL);优化工艺条件下卵磷脂提取率为84.47%,高效液相色谱(HPLC)检测产品中磷脂酰胆碱(PC)组分含量为71.57%。(2)采用磷脂酶D催化合成磷脂酰丝氨酸。运用单因素和正交试验的方法优化合成工艺,考察了催化合成过程中pH、温度、丝氨酸浓度和两相体积比等因素对磷脂酰丝氨酸生成率的影响。试验结果表明最佳合成工艺为:将磷脂酶D酶液和钙离子加入0.14g/ml的丝氨酸缓冲溶液中,有机相与无机相体积比为10:1,在pH为6.0和30℃条件下反应4h,此时磷脂酰丝氨酸的生成率最大达到42.92%。(3)采用柱层析法对磷脂酰丝氨酸分离纯化。探究硅胶对磷脂酰丝氨酸静态吸附性能,并用动力学吸附方程和等温吸附方程研究硅胶对磷脂酰丝氨酸的结合特性。最后试验结果表明,利用硅胶分离纯化磷脂酰丝氨酸,最终得到磷脂酰丝氨酸纯度为67.28%,回收率为48.62%。