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目的建立肝癌对索拉非尼(Sorafenib)耐药细胞株Bel-7402/Sora并初步探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)逆转其耐药性的作用及其相关机制。方法1.CCK8法检测Sorafenib对肝癌细胞Bel-7402的增值抑制作用,计算其半抑制浓度(IC50),建立肝癌对索拉菲尼耐药细胞株Bel-7402/Sora。倒置显微镜下观察两种细胞株的形态学变化。测定肝癌耐药细胞株的IC50并计算其耐药倍数。Western-blot法检测两种细胞在给予不同浓度Sorafenib时蛋白GRP78和Beclinl的表达差异。2.检测不同浓度EGCG对肝癌耐药细胞株与亲本细胞株的增殖抑制作用,并计算出EGCG的无细胞毒性浓度。对比不同浓度的Sorafenib联合无毒性浓度EGCG前后对肝癌耐药细胞株增殖的影响,计算其逆转倍数及相对逆转效率。Western-blot法检测不同浓度Sorafenib联合无毒性浓度EGCG前后蛋白GRP78和Beclinl的表达差异。结果1Sorafenib对肝癌细胞株Bel-7402的增殖具有抑制作用,呈浓度依赖性,IC50值为1.654μmol/L。对比亲本细胞株,耐药细胞株体积增大,胞形不规则,大量空泡与颗粒于胞质内出现。检测耐药细胞株的IC50值为10.344μmol/L,耐药倍数为6.25。随着Sorafenib浓度的升高,两种细胞内的GRP78表达量均增加,Beclinl的表达量先减少后增加,两种蛋白在耐药细胞中的表达量高于亲本细胞。2.不同浓度Sorafenib联合无毒性浓度EGCG作用肝癌耐药细胞后,细胞存活率较前降低,联合用药的IC50值为7.312μmol/L,逆转倍数约为1.415倍,相对逆转效率为34.89%。一定浓度Sorafenib联合无毒性浓度EGCG作用于肝癌耐药细胞后蛋白GRP78和Beclinl表达量均较联合前减少。结论1.成功建立了肝癌细胞对索拉非尼耐药细胞系Bel-7402/Sora,GRP78和Beclin1参与了细胞耐药性的形成。2.EGCG可能通过降低蛋白GRP78和Beclinl的表达来逆转肝癌细胞的索拉菲尼耐药性。