大黄素是从蓼科植物虎杖(Reynoutria japonica Houtt)、大黄(Rheum officinale Baill)等根茎中提取的主要有效单体,其化学名称为1,3,8-三羟基-6-甲基蒽醌,具有抗菌消炎、抗氧化及清除氧自由基、降血脂、保护肝脏和免疫调节多种功效。随着水产养殖业的发展,高温、氨氮己经成为水产经济动物养殖中常见的应激因子,给水产养殖业造成的经济损失也越来越大。本试验以团头鲂为研究对象,针对南方夏季高温季节养殖水质易恶化的问题,模拟实际养殖过程中高温、高氨氮环境下病原菌易感染的现象,研究高温高氨氮应激对团头鲂生长、血液生理、免疫、应激蛋白HSPs、组织结构的影响及大黄素的调控作用,为大黄素在防治鱼病和缓解应激方面提供参考依据。选取300尾健康的团头鲂[初均重(7.29±0.01)g],两种温度下(25℃、30℃)分别投喂不添加和添加25mg/kg大黄素配合饲料,连续投喂77d后,各组进行10mg/L氨氮应激14d,最后各组进行嗜水气单胞菌攻毒试验,研究大黄素抗应激与抗病原菌感染的调控作用。1、高温下大黄素对团头鲂生长及血液指标的影响养殖结束后,测定团头鲂的生长性能,并采样检测团头鲂血液学指标。结果表明：30℃组,鱼体增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、红细胞积压(HCT)和血浆乳酸脱氢酶(LDH)显著高于25℃组,饵料系数(FCR)、脏体比(VSI)、皮质醇、谷草转氨酶(AST)、尿素(UREA)、甘油三酯(TG)显著低于25℃组(P<0.05)；大黄素组,SGR、肝体比(HSI)、HCT和LDH显著高于对照组,FCR、摄食率(FR)、皮质醇显著低于对照组P<0.05)。温度和大黄素对团头鲂白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB),三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、ALT、葡萄糖、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C).低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)无显著影响(P>0.05),对总胆固醇(TC)、补体3(C3)、补体4(C4)存在显著交互作用(P<0.05)。高温下,添加大黄素组C3、C4显著高于对照组(P<0.05)。30℃大黄素组,TC显著高于30℃对照组P<0.05),与常温对照组无显著差异(P>0.05)。结果表明,饲料中添力25mg/kg大黄素有助于缓解长期高温对团头鲂血液生理的影响,提高免疫力,促进鱼体的生长。2、高温下大黄素对团头鲂抗氨氮应激及感染嗜水气单胞菌的影响养殖结束后,对各组进行连续14d氨氮应激(10mg/L)试验,分别于0d、2d、7d和14d采样,检测团头鲂血液和肝脏生化指标,肝脏HSPs mRNA表达水平和头肾超微结构,并在14d应激后进行腹腔注射嗜水气单胞菌攻毒试验,统计24h、48h、96h累计死亡率。结果表明：与氨氮应激前相比,常温对照组AST、UREA、葡萄糖、HSP60mRNA的表达水平在氨氮应激2d后显著升高,TG显著下降(P<0.05)；常温对照组皮质醇、T4、C4、HSP70mRNA的表达水平在氨氮应激7d后显著升高,TC、HSP90mRNA的表达水平显著下降(P<0.05)。高温对照组皮质醇、T3、T4、AST、UREA、TG、TC、C3、C4、HSP60、HSP70mRNA的表达水平均在氨氮应激2d后显著升高(P<0.05)；高温对照组HSP90mRNA的表达水平在氨氮应激7d后显著下降(P<0.05)。氨氮应激14d后,高温对照组葡萄糖和HDL-C以及常温对照组C3显著升高(P<0.05)；常温对照组LDL-C、一氧化氮(NO)显著下降P<0.05)。两种温度下血浆皮质醇、T4、C4、HSP70在氨氮应激后均显著升高,且高温组先于常温组,可见,高温下氨氮应激鱼类生理指标反映更为迅速。与对照组相比,大黄素显著增加了氨氮应激2d、7d后HSP60、 HSP70、HSP90mRNA的表达水平以及14d后HSP70、HSP90mRNA的表达水平,降低了应激7d后皮质醇、活性氧(ROS)含量(P<0.05)。头肾超微结构显示,长期慢性30℃高温下头肾细胞核出现轻微的萎缩,添加大黄素对头肾细胞具有一定的保护作用。氨氮应激会引起头肾细胞损伤,且随着氨氮应激时间的延长,损伤逐渐加重。氨氮应激后各组感染嗜水气单胞菌死亡率由高到低依次为25℃对照组、30℃对照组、30℃大黄素组、25℃大黄素组,表明较常温下,高温下氨氮应激鱼体更容易感染嗜水气单胞菌,死亡率增加。饲料中添加大黄素可降低团头鲂在氨氮应激下病原菌感染的死亡率。本研究表明,氨氮应激导致团头鲂代谢、免疫、抗氧化等机能变化；饲料中添加25mg/kg大黄素促进了团头鲂生长,可提高团头鲂免疫力、抗氧化能力以及三种HSPs mRNA的表达水平,有效地增强团头鲂抗氨氮应激的能力及氨氮应激下抗嗜水气单胞菌感染能力。