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目的:研究美国薄荷精油对碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌（CRAB）的抗菌作用及其可能的作用机制,为暴发流行的CRAB提供可靠的治疗依据。方法:1.收集临床分离CRAB菌株通过VITEK-2 Compact全自动微生物分析仪及配套鉴定卡和药敏卡进行CRAB菌株初筛,根据2020年CLSI标准判断折点,挑选出对碳青霉烯类抗菌药物（亚胺培南、美罗培南、厄他培南）中任一种药物耐药的菌株,并纸片法复核,作为实验菌株,用自动生物质谱检测系统对试验菌株进行质谱分析。2.通过K-B法测定精油对CRAB的敏感性、微量肉汤稀释法测定美国薄荷精油的MIC值以及MBC值。3.棋盘滴定实验确定美国薄荷与多粘菌素B联用对CRAB的协同效果,联合所用的精油浓度为精油MIC值的1/8-2倍。4.时间生长曲线监测美国薄荷在24小时内不同时间点对CRAB的杀菌效果。5.通过结晶紫染色法生物膜抑制实验测定MIC值的1/16-2倍浓度下精油对CRAB生物膜的抑制作用。6.生物发光法测定精油作用后细胞内ATP含量的变化。7.流式细胞仪测定精油作用后细菌PH值以及膜电位的变化。8.扫描电镜下观察精油作用后细胞形态的变化。结果:1.菌株的分布:48株鲍曼不动杆菌标本类别:痰液38株（79.1%）,分泌物1株（2.1%）,血液1株（2.1%）,胆汁1株（2.1%）,其他标本7株（14.6%）。（图1.）主要来自重症监护病房28株（58%）,神经外科8株（17%）,呼吸与危重病房9株（19%）,整形烧伤美容2株（4%）急诊内科1株（2%）。2.美国薄荷精油的主要成分:麝香草酚,Y-松油烯,邻-聚伞花素,1-辛烯-3-醇,2-甲氧基-5-甲基-异丙苯,芳樟醇,4-蒈烯,3-崖柏烯,月桂烯。其中麝香草酚的含量可以达69.75%。3.质谱检测系统鉴定结果分析:48株试验菌株经质谱分析后均进一步确定为鲍曼不动杆菌。4.48株CRAB均对美国薄荷精油敏感,并且含有5%DMSO的纸片无抑菌作用,因此使用DMSO作为助溶剂溶解精油对本实验无影响。5.测得48株CRAB精油最低抑菌MIC为0.625μl/ml,对照组含有2.5%DMSO对细菌生长无抑制作用。MBC范围为0.625μl/ml～1.25μl/ml。6.精油对CRAB生长动力学的影响:0-2h内各浓度处理的CRAB均未生长,从2h开始,0,1/4MIC,1/8MIC,1/16MIC浓度下的CRAB逐渐生长,4h开始1/2MIC浓度下的CRAB生长缓慢,MIC,2MIC下CRAB完全被抑制。7.细胞内ATP浓度结果分析:经美国薄荷MIC处理后的CRAB内ATP含量比未经处理的CRAB内ATP含量降低,2MIC处理后CRAB与阴性对照组相比ATP含量进一步降低。8.PH值结果分析:未处理的CRAB细胞的p H平均值为6.27±0.12,美国薄荷MIC处理组细胞的p H值从6.27±0.12降至4.33±0.31,加入2MIC美国薄荷后,与阴性对照组相比,p H值由6.27±0.12进一步降至3.23±0.21。9.膜电位变化分析:经美国薄荷处理的细胞显示细胞膜超极化,荧光强度（负值）明显降低。10.美国薄荷对CRAB生物膜形成的影响:在1/4MIC,1/8MIC,1/16MIC美国薄荷作用下,轻度抑制CRAB生物膜形成,1/2MIC,MIC作用下生物膜形成能力降低幅度变大,2MIC作用下生物膜形成能力最低。11.美国薄荷对CRAB细胞形态的影响:FESEM分析表明,未经美国薄荷处理的CRAB呈球杆状,表面光滑。经美国薄荷MIC和2MIC处理后,CRAB表面出现塌陷损伤。12.联合抗菌实验结果分析:协同作用23株（48%）,相加作用13株（27%）,无关作用12株（25%）,拮抗作用0株（0%）。结论:1.美国薄荷精油对CRAB具有良好的抑菌活性并且与多粘菌素B联合使用后,对大多数CRAB有协同抗菌作用,并且大大降低了多粘菌素B的使用剂量,为开发新的用药措施提供了有效依据。2.美国薄荷精油可破坏CRAB细胞膜的完整性,导致CRAB细胞内ATP浓度降低,PH降低以及膜电位降低。3.美国薄荷精油对CRAB生物膜的形成具有抑制作用,并且随着其浓度增加抗生物膜活性越强。4.展望:美国薄荷含有太多不同类型的化合物成分,由于实验条件及时间有限,未能对各种成分进行详细的研究。在日后将深入研究是其主要的成分发挥的作用,还是某些成分协同发挥抗菌活性,为开发传统天然产物对抗耐药细菌提供更具体的数据。