铜绿假单胞菌NY3及其突变株降解油污泥同步产生物聚合物的特性研究

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油污泥成分复杂,属于危险性固体废弃物,其随意堆放会对环境造成严重污染,已成为石油化工行业可持续发展的障碍。微生物处理油污泥具有运行成本低,不易产生二次污染等优点,本论文探索微生物降解油污泥同时合成具有潜在使用价值生物质的可行性及其工艺条件,开发绿色油污泥无害化和资源化的技术。本文以铜绿假单胞菌NY3及其突变株NB1D(敲除alkB1基因)、NB2D(敲除alkB2基因)、NB12DD(同时敲除alkB1、alkB2基因)等为受试菌株,以陕北油田所产生油污泥为研究对象,以气相色谱、红外、紫外、激光粒径分布和扫描电镜等为分析手段,利用静态好氧培养法进行相关研究,获得以下成果:(1)NY3菌及其突变株均能降解油污泥中烃类,且突变株NB1D的降解效率高于NY3、NB2D、NB12DD等菌株。双突变菌NB12DD具烃降解能力,说明野生菌NY3中alkB2基因在直链烷烃降解中起主要作用,而alkB1基因起次要作用。(2)各菌株降解油污泥时均能产胞外聚合物,外加葡萄糖和丙酮酸为共代谢碳源均可提高原油降解率和胞外聚合物的产量,与未外加共代谢碳源相比,葡萄糖使NY3、NB1D、NB2D、NB12DD等菌对油污泥中原油降解率分别提高48.74%、7.21%、45.11%、13.27%,同时使胞外聚合物产量分别提高83.3%、79.8%、20.6%、62.9%;发酵液初始pH为8-9,四菌株所分泌胞外聚合物量最多,分别可达8.14g/L、4.34g/L、4.94g/L及7.15g/L。(3)所产胞外聚合物对菌株降解油污泥有明显促进作用,尤其是对油污泥中长链烷烃C14-C32,当外加3.5g/L上述菌株所产胞外聚合物时,NY3菌降解油泥中直链烷烃C14-C32的效率平均提高24.25%。(4)各菌株所产胞外聚合物主要为多糖混合物,91.1%多糖分子粒径分布在33.0-716.9μm范围。多糖聚合物主要由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖等单糖聚合而成。(5)NY3菌及其突变株均能利用油污泥为碳源于胞内合成并积累PHA类高能物质,采用次氯酸钠/氯仿提取胞内PHA,发现相同降解条件下,突变株NB2D降解油污泥5d后于胞内合成并积累PHA的量比其它菌株多,可达42mg/g干菌。
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