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本课题利用生物信息学手段分析普通烟草VDE基因的EST(expressed sequence tag)序列,采用同源序列克隆的方法,从普通烟草中烟100中克隆VDE(按照国际惯例基因名称采用大写斜体)基因序列和编码序列;利用PCR结合测序技术确定VDE在烟草基因组中的拷贝数;使用荧光定量PCR技术分析VDE在不同器官、不同品种和不同胁迫条件下的表达模式;采用蛋白纯化技术在体外分析VDE的酶活在不同温度条件下的变化,比较不同VDE拷贝的酶活变化;利用转基因技术获得VDE过表达遗传材料,验证VDE的功能