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四逆汤是东汉张仲景创制的经典名方之一,为《伤寒论》回阳救逆代表方。方由附子、干姜、炙甘草三味药组成,方简效宏,具有温中祛寒,回阳救逆之功。临床主要用于阳虚欲脱,冷汗自出,四肢厥逆,下利清谷,脉微欲绝。现代药理研究表明:该方除具有显著的强心、升压和抗休克作用外,还具有兴奋垂体——肾上腺皮质的功能及中枢性镇痛,镇静作用。 为了阐明传统药物治疗疾病的物质基础,探索中药复方化学的研究方法,我们对该方进行了较系统的化学成分研究,旨在为中药复方的质量控制、临床应用和中药现代化奠定一定的基础。 以复方四逆汤水煎剂为研究对象,利用各种色谱、光谱学方法对其化学成分进行系统分离和结构鉴定。从中共分离得到25个化合物,鉴定了23个化合物的结构,其中黄酮类化合物15个(包括黄酮2个;异黄酮2个;二氢黄酮7个;查尔酮3个;紫檀烷1个);三萜类化合物2个;香豆素类化合物2个;嘧啶1个;其他类化合物3个(2个有机酸,1个辣味素),发现了一个新的二氢黄酮苷类化合物:6″-α-羟基丙酰基甘草苷。经光谱分析和HPLC-MS/MS联用技术确认该新化合物是以一对差向异构体的形式存在于复方及单味药甘草中。 利用HPLC技术对分离得到的20个化合物进行了标准曲线的绘制,并对其中17个化合物在复方中的含量进行了测定;分析比较了13个化合物在复方中与在单味药中的含量差异。通过比较复方和各单味药色谱图差异,探讨了各单味药对复方的不同贡献。通过HPLC-MS/MS结合LC-DAD-UV技术对分离所得各化合物的不同来源进行了指认。利用HPLC-MS/MS技术结合文献资料对复方中若干未知成分的结构进行了推测并对其来源进行了指认。 对复方四逆汤全方进行了药理实验研究,结果表明四逆汤对失血性休克大鼠有强心、升压作用,其作用机制可能与调节肾上腺素α和β受体有关。