肥胖在全球范围内快速增长、广泛流行。脂肪细胞是脂肪组织的主要组成部分,在肥胖的发展过程中伴随着脂肪细胞体积的增大和数量的增多。因此,调控前脂肪细胞的分化和成熟脂肪细胞的脂肪生成,是一种改善肥胖的有效策略。机制研究显示,在脂肪细胞分化的过程中,伴随着甘油三酯的积累,细胞内还积累了大量的活性氧（ROS）。外源性和内源性ROS都具有促进前脂肪细胞分化的作用。过量的ROS导致脂肪细胞内氧化还原平衡失调,导致肥胖及其相关代谢疾病的发生。多种膳食黄酮具有明显的抗脂肪细胞分化作用,然而这些黄酮类化合物是否通过减少ROS的产生来引起这一作用,目前尚不清楚。在本研究中,我们选择了食物中常见的六种黄酮,木犀草素、槲皮素、杨梅素、芹菜素、山奈酚和白杨素,它们都具有5,7-二羟基黄酮（即白杨素）的基本骨架,区别只在于B环和C环上羟基取代基的数目和位置不同。利用3T3-L1前脂肪细胞,通过MTT实验,我们首先确定了在0-30μM的浓度范围内,六种黄酮都不影响细胞的生存率;然后使用10、20和30μM的六种黄酮处理细胞分化过程,油红染色的结果表明10μM的六种黄酮没有抑制3T3-L1脂肪细胞脂质沉积,20μM和30μM的六种黄酮都抑制了3T3-L1脂肪细胞脂质沉积,并且在20μM的浓度条件下,六种黄酮（木犀草素、槲皮素、杨梅素、芹菜素、山奈酚和白杨素）抗脂肪细胞分化活性差异较大,抑制率分别为49%、60%、67%、83%、83%和88%。通过油红染色以及RT-PCR实验,发现六种黄酮抗脂肪细胞分化活性具有浓度依赖性,其活性相关等级为:木犀草素＞槲皮素＞杨梅素＞芹菜素/山奈酚＞白杨素,表明B环上的C-3’和C-4’存在羟基取代以及C环的C-3无羟基取代有利于促进黄酮类化合物抗脂肪细胞分化的活性。进一步,我们确定了20μM为比较六种黄酮活性差异的合适浓度。在3T3-L1前脂肪细胞分化的不同阶段加入六种黄酮进行处理,油红染色的结果表明六种黄酮通过抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的早期来抑制细胞分化。为了探究木犀草素是否通过抑制ROS的产生来抑制脂肪细胞分化,我们使用了DCFH-DA荧光探针法和western blot实验,监测了木犀草素处理3T3-L1前脂肪细胞分化早期阶段和全分化阶段,细胞内ROS和过氧化氢酶的表达水平,发现木犀草素明显的抑制了3T3-L1前脂肪细胞分化早期和分化后ROS的产生以及抗氧化酶蛋白的表达。过氧化氢（H2O2）是细胞内主要的ROS之一,H2O2处理能够易化3T3-L1前脂肪细胞分化。最后,我们在这一培养体系中,引入木犀草素和合成的抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）,以评价木犀草素对H2O2易化的脂肪细胞分化的影响,发现木犀草素和NAC一样,能够明显抑制H2O2易化的脂肪细胞分化。这些结果表明木犀草素通过降低ROS的产生来抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化。综上所述,通过对六种膳食黄酮活性的比较,我们发现六种黄酮都具有抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的活性,其中木犀草素抑制活性最强;木犀草素通过减少ROS的产生来抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化,阐明了膳食黄酮抗脂肪细胞分化作用的一种新的机制,为合理的利用膳食黄酮提供了理论依据。