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本研究运用细胞培养、MTS分析、RNA干扰、Western bloting等细胞学分子生物学技术和方法,以Raji细胞为实验对象,研究了PTEN活性与Akt信号转导在hsBAFF诱导B细胞增殖和存活中作用；通过上调PTEN表达、或抑制／钝化Akt活性,进一步探讨了hsBAFF促B细胞增殖和存活过程中,PTEN/Akt功能活性与Erkl/2通路激活的关系。本研究旨在为理解BAFF调控B淋巴瘤与自身免疫性疾病发生提供理论基础和科学依据。结果如下：1 hsBAFF促进B细胞增殖和存活关联PTEN抑制和Akt激活Raji细胞用0-0.25 μg/ml hsBAFF处理12h或48 h、或用0.25μg/ml hsBAFF处理0-24 h、或在用Akt抑制剂X(10μM)预处理1 h后加hsBAFF (0.1和0.25 μg/ml)处理12 h或48 h；在一些情况下,分别用Ad-PTEN和Ad-GF P感染的Raji细胞用hsBAFF (0.1和0.25μm/ml)处理12h或48h。然后,通过细胞计数和MTS分析评估细胞增殖和存活表现、Western blotting检测PTEN、Akt及其相关信号分子表达。结果显示：hsBAFF以浓度和时间依赖方式促进Raji细胞增殖和存活、增加Survivin以及PTEN、Akt、S6K14E-BP1、GSK3β磷酸化表达；抑制Akt活性阻滞hsBAFF诱导Bcl-2和Survivin增加以及S6K1、GSK3β磷酸化增加,进而削弱细胞增殖和存活；PTEN过表达部分地抑制hsBAFF诱导Bcl-2、 Survivin升高以及PTEN、Akt、S6K1、4E-BP1、GSK3β磷酸化增加,并因此降低细胞增殖和存活。提示：hsBAFF抑制PTEN和激活Akt活性促进B细胞增殖和存活。2 hsBAFF通过激活Akt-Erk1/2信号通路促进B细胞增殖和存活Raji细胞或Ad-dn-Akt、Ad-MKK1-K97M的感染Raji细胞用Akt抑制剂X(10μM)和/或Erk1/2抑制剂PD98059 (10μM)预处理1h后加hsBAFF (0.1和威0.25μg/ml)处理12 h或48 h。然后,通过细胞计数和MTS分析评估细胞增殖和存活表现、Western blotting检测相关信号分子表达。结果显示：hsBAFF可以通过Akt通路调控Erkl/2活性促进Raji细胞增殖和存活。这被抑制Akt活性削弱hsBAFF诱导的Erkl/2磷酸化和Raji细胞增殖和存活,以及钝化Akt部分地阻止hsBAFF诱导Erkl/2磷酸化和Raji细胞增殖和存活,以及钝化MKK1抑制Raji细胞增殖和存活证据支持。提示：hsBAFF通过激活Akt-Erkl/2信号通路促进B细胞增殖和存活。3 hsBAFF通过抑制PTEN激活Erkl/2通路促进B细胞增殖和存活Ad-PTEN和Ad-GFP感染的Raji细胞用hsBAFF (0.1和0.25μg/ml)处理12 h、或用Erkl/2抑制剂PD98059(10μM)预处理1h后加hsBAFF (0.2 5 μg/ml)处理12h或48 h。然后,通过细胞计数和MTS分析评估细胞增殖和存活表现、Western blotting检测相关信号分子表达。结果显示：过表达PTEN消弱hsBAFF诱导的Erkl/2磷酸化,提高PD98059抑制hsBAFF促进Raji细胞增殖和存活。提示：hsBAFF通过PTEN激活Erkl/2通路促进B细胞增殖和存活。