目的：观察过敏性紫癜肾炎(HSPN)患儿及健康患儿的血清热聚合IgA1(aIgA1)对足细胞及系膜细胞的增殖影响,并制备 HSPN系膜细胞、足细胞损伤模型。用含药血清作用于HSPN细胞损伤模型,显微镜下观察系膜细胞增殖,足细胞形态变化,并从基因水平检测用药前后足细胞podocin mRNA表达的影响。 　　方法：本实验通过亲和层析法纯化紫癜性肾炎(血尿蛋白尿型)患儿血清 aIgA1,作用于系膜细胞、足细胞制备 HSPN系膜细胞、足细胞损伤模型。制备清热止血颗粒、雷公藤多甙、清热止血颗粒+雷公藤多甙、强的松+肝素四组含药血清,干预 HSPN 细胞损伤模型,观察系膜细胞、足细胞形态,通过 MTT 法检测细胞增殖情况,ELISA法检测 TNF-a分泌情况,RT-PCR检测足细胞 podocin mRNA表达量。 　　结果： 　　1.系膜细胞情况： 　　1.1 HSPN患者aIgA1在0.25mg/ml,0.5mg/ml,1mg/ml,2mg/ml作用系膜细胞48小时各浓度组较对照有统计学意义。在0.25mg/ml时开始促进系膜细胞增殖,在 1mg/ml 促进系膜细胞增殖作用最大(P=0.000)。健康组 aIgA1 在 0.5mg/ml, 48小时较对照组差异有统计学意义,在0.5mg/ml时开始促进系膜细胞增殖。 　　1.2 aIgA1刺激系膜细胞分泌TNF-α的情况,48小时HSPN患者及健康对照者aIgA1组较对照组有统计学意义(P=0.000,P=0.003)。 　　1.3含药血清组清热止血颗粒、雷公藤多甙、清热止血颗粒+雷公藤多甙、强的松+肝素各组干预HSPN系膜细胞损伤模型48小时,检测细胞增殖,清热止血方+TW较对照组有统计学意义(P=0.014)。 　　1.4各用药组干预HSPN系膜细胞损伤模型,检测TNF-α分泌,48小时各组均较对照组有统计学意义,其中强的松+肝素、清热止血方、清热止血方+TW 组较对照组差异性最大(P=0.000,P=0.000,P=0.000)。 　　2.足细胞细胞情况： 　　2.1 HSPN患者aIgA1与系膜细胞共培养上清液、HSPN患者aIgA1、健康对照者刺激足细胞分泌 TNF-α的情况, 48 小时后各组较对照组有统计学意义。(P=0.000,P=0.000,P=0.003)。 　　2.2各组含药血清对足细胞损伤模型( HSPN患者aIgA1-系膜细胞共培养上清组)分泌细胞因子 TNF-α干预 48 小时各组较对照组差异有统计学意义(P=0.000)。清热止血方联合雷公藤多苷,强的松加肝素较对照组差异更大。 　　2.3 各组含药血清对足细胞损伤模型( HSPN 患者 aIgA1 组)分泌细胞因子TNF-α干预 48 小时各组较对照组差异有统计学意义,清热止血方+TW、TW 较对照组差异性更大(P=0.000)。 　　3.RT—PCR检测足细胞podocin mRNA的表达 　　3.1 HSPN患者algAl及algAl与系膜细胞共培养上清刺激足细胞24小时后,两者均可下调podocin mRNA的表达(p=0.042,p=0.036)。两两比较无统计学意义。作用48小时后,两者均下调podocin mRNA的表达。(p=0.032,p=0.009)。上清组与患者algAl比较有统计学意义(p=0.048) 　　3.2雷公藤多甙组、清热止血方+TW组、强的松加肝素组作用于 HSPN足细胞损伤模型(aIgA1刺激组)24小时,较对照组统计学均有意义,清热止血方组虽较对照组比无统计学意义；48小时,各组较对照组均有统计学意义。 　　3.3含药血清干预足细胞损伤模型(aIgA1与系膜细胞共培养上清)24小时,各组较对照组均有统计学意义；48 小时,清热止血方和清热止血方加 TW 组 较空白对照组均有统计学意义(P=0.009,P=0.000)。 　　结论： 　　1.通过体外纯化 mIgA1并热聚合成 aIgA1,HSPN 患儿血清中 IgA1水平较健康对照组高。 　　2.HSPN患儿血清中aIgA1作用于HSPN系膜细胞、足细胞,TNF-α的分泌是肾小球系膜细胞、足细胞损伤的重要表现,并在 HSPN进展中起着关键作用。 　　3.清热止血方+GTW 上调足细胞损伤模型(aIgA1 与系膜细胞共培养上清) podocin mRNA表达,两者协同保护足细胞的作用效果优于西药组和两者单用组,且有效作用时间长。