目的应用RNA干扰技术(RNAi)研究针对E2F-1基因的siRNA,抑制胃癌MGC803细胞E2F-1基因的表达,研究对细胞中Rb蛋白的影响。方法将本实验室保存的重组质粒E2F-l-siRNA扩增并做测序鉴定,用LipofectamineTM2000把质粒转入胃癌MGC803细胞,转染48h后,通过RT-PCR检测转染前后实验组、阴性对照组、未转染组细胞E2F-1 mRNA表达水平,蛋白免疫印记法(Western blotting)检测各组细胞E2F-l蛋白的表达来证明质粒是否转入细胞。采用蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测三组细胞中总Rb蛋白和磷酸化Rb蛋白的表达情况,从而计算出非磷酸化Rb蛋白表达情况,统计各组间的差异。结果重组质粒成功扩增后,由脂质体介导成功转入胃癌MGC803细胞,E2F-1-siRNA有效抑制了胃癌细胞E2F-1 mRNA的表达,E2F-1蛋白水平显著下降,与阴性对照组及未转染组细胞比较降低了83.2%和84.6%;实验组与阴性对照组及未转染组细胞比较,去磷酸化Rb蛋白分别增加了61.22% ( p<0.05 )和66.60% ( p<0.05 ) ,差异有统计学意义。结论E2F-1-siRNA能有效抑制人胃癌MGC803细胞E2F-1 mRNA及蛋白表达,并且沉默表达E2F-1基因后,可以有效抑制Rb蛋白的产生。提示在胃癌细胞中E2F-1基因和Rb基因之间可能存在某种拮抗作用,E2F-1基因可作为胃癌治疗的潜在靶点,对胃癌分子机制进行了进一步研究。