酶解马铃薯蛋白及其饲喂效果研究

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研究胃蛋白酶和胰蛋白酶体外酶解马铃薯蛋白的最适酶解参数。在此基础上,通过考察酶解产物对断奶仔猪生产性能、肠道形态与发育、血液指标的影响评价其在断奶仔猪上的饲喂效果。试验一:蛋白酶体外酶解马铃薯蛋白适宜酶解参数研究为了确定胃蛋白酶和胰蛋白酶体外酶解马铃薯蛋白的最适酶解参数。先做温度梯度试验确定胃蛋白酶和胰蛋白酶酶解马铃薯蛋白的最适酶解温度(温度梯度设为40、45、50、55℃);再通过L9(34)不完全正交试验分别确定两种酶对马铃薯蛋白的最适反应条件(胃蛋白酶初始pH设为0.8/1.8/2.8三个水平、酶浓度设为1000/3000/5000U/g原料三个水平;胰蛋白酶初始pH设为7.0/8.0/9.0三个水平、酶浓度设为200/350/500U/g原料三个水平,两种酶的反应时间均设为15/25/35h三个水平);最后进行双酶联合水解研究(先用胃蛋白酶处理或先用胰蛋白酶处理,胃蛋白酶的用量始终被固定在2000U/g底物,胰蛋白酶的用量分别被设为最佳酶浓度的1/4、1/2、3/4)。试验结果显示胃蛋白酶和胰蛋白酶单酶酶解马铃薯蛋白的最优条件分别是初始pH=1.8和9.0、温度为50和45℃、酶浓度为5000和500U/g底物、反应时间均为35小时。联合酶解最优条件为:先用胰蛋白酶在初始pH=9.0、温度为45℃、酶浓度为250U/g原料的条件下酶解20h,再用胃蛋白酶在pH=1.8、温度为50℃、酶浓度为2000U/g原料的条件下酶解15h,加碱调pH至中性可得最终产品。测得产品水解度为9.86%,TCA-NSI为49.28%,Gln得率为86.39%,分子量小于1kDa的肽中Gln含量为1.73%,分子量大于1kDa小于0.45μm的肽中Gln含量为4.12%,肽中Gln总含量为5.85%,未检测到还原糖。试验二:马铃薯蛋白体外酶解产物在断奶仔猪上的饲喂效果研究在试验一的基础上,为了评价酶解马铃薯蛋白在断奶仔猪上的饲喂价值,试验采用单因子试验设计,选择26±2日龄初始体重7.38±0.66kg断奶仔猪28头,分到4个处理组中,每个处理7个重复,每个重复1头猪。用5%未酶解马铃薯蛋白、5%酶解马铃薯蛋白和5%血浆蛋白等能等氮代替对照日粮中的豆粕。试验期14天,分别在试验第1、8、15天清晨空腹称重后采血10ml;第15天,每个处理选择6头仔猪放血杀猪取肠道组织切片样和肠道粘膜样。试验结果表明:①酶解组较对照组和未酶解组能提高第一周ADG、ADFI,并降低F/G,其中酶解组第一周ADG显著高于对照组(P<0.05)。在第二周和全期,酶解组、对照组和未酶解组的生产性能相当,差异不显著(P>0.05)。血浆蛋白组在各个阶段都能显著或极显著提高仔猪ADFI、ADG,并降低F/G(P<0.05或P<0.01)。②与其它所有处理组相比,酶解组都能显著或极显著提高小肠各肠段绒毛高度(P<0.05或P<0.01),极显著降低各肠段粘膜隐窝深度(P<0.01)。③与其它所有处理组相比,酶解组都显著提高空肠和回肠粘膜中蛋白质含量(P<0.05);酶解组较对照组和血浆蛋白组能显著或极显著提高肠粘膜DNA浓度;虽然酶解组也有提高肠道RNA浓度的趋势,但各处理组之间差异不显著(P>0.05)。④酶解组较其它所有处理组都能极显著提高肠粘膜SIgA含量(P<0.01),但肠粘膜Gln含量的差异并不显著(P>0.05)。⑤与对照组和血浆蛋白组相比,酶解组和未酶解组(特别是酶解组)都能显著或极显著提高血清总蛋白含量、球蛋白含量、血清Glu含量,降低血清A/G;也提高了血清尿素氮水平:但对血清Gln含量的影响不显著。
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