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目的:肥胖人群快速增长使得肥胖相关性高血压的发生率持续增加,但目前仍缺乏有效的针对性治疗药物。依据我们既往临床经验,认为肥胖相关性高血压的发生与“脾失健运,肝失疏泄”有关,其治疗应以健脾疏肝为主。据此,我们以黄芪为君药,自拟疏肝运脾方,并采用自身前后照研究观察疏肝运脾方对肥胖相关性高血压患者的治疗作用。现代研究发现肥胖机体下丘脑中IKKβ/NF-kB促炎通路激活可导致瘦素抵抗,后者引起的中枢交感神经传出兴奋增加是引起血压升高的重要机制之一。激活胆碱能抗炎通路关键受体α7nAchR可抑制机体IKKβ/NF-kB促炎通路,降低机体炎症反应。黄芪为疏肝运脾方的君药,现代药理研究发现在多种疾病中,黄芪的主要成分之一黄芪甲苷(As Ⅳ)可抑制IKKβ/NF-kB促炎通路,减轻机体炎症反应。据此,我们假设激活α7nAchR可通过抑制炎症反应,减轻瘦素抵抗介导的交感神经过度兴奋而起到抵抗肥胖相关性高血压的作用。As Ⅳ可通过抑制IKKβ/NF-kB促炎通路降低肥胖诱导的血压升高,并且As Ⅳ的这种作用可能部分与其上调α7nAchR有关。本研究通过动物实验证明激活胆碱能抗炎通路是治疗肥胖相关性高血压的新靶点,并证明As Ⅳ对高脂饮食诱导肥胖相关性高血压动物模型的治疗作用及其机制。方法:(1)采用小样本前瞻性开放、自身前后对照研究评价疏肝运脾方对肥胖相关性高血压患者的血压、糖脂代谢和炎症因子的影响。(2)高脂饮食16周诱导肥胖高血压大鼠模型,分为模型对照组(HF con组)、α7nAchR激动剂组(PNU组)和α7nAchR激动剂+抑制剂组(PNU+α-BGT组)。PNU组给予腹腔注射α7nAchR激动剂PNU-282987(3mg/Kg/d),α-BGT+PNU组腹腔注射α7nAchR抑制剂α-BGT(1μg/Kg/d),同时腹腔注射PNU-282987(3mg/Kg/d)。各组均持续给药6周。比较各组大鼠的肥胖程度、糖脂代谢、血压情况;Elisa法检测血浆和肾脏去甲肾上腺素(NE)含量以反应交感神经活性;利用Western blot或qRT-PCR法检测下丘脑和脂肪组织中α7nAchR、IKKβ,NF-kB,IL-1β和TNF-α的蛋白或mRNA表达水平以反应IKKβ/NF-kB促炎信号通路活性;利用Western blot或qRT-PCR法检测下丘脑瘦素信号分子(LepRb mRNA、p-PI3K、p-STAT3、PTP1B mRNA、SOCS3 mRNA)以反应瘦素信号敏感性。(3)高脂饮食诱导肥胖高血压大鼠模型,分为模型对照组(HF con组)、As Ⅳ组和As Ⅳ+α7nAchR抑制剂组(As Ⅳ+α-BGT组),其中As Ⅳ组和As Ⅳ+α-BGT组均持续灌胃6周As Ⅳ(20mg/Kg/d),As Ⅳ+α-BGT组灌胃同时腹腔注射α-BGT。检测指标同(2)中所述。结果:(1)疏肝运脾方治疗后可降低患者体重,降低血压和心率,纠正代谢紊乱,降低血中hs-CRP和IL-6水平,改善眩晕、胸胁胀满、肢体困重、心烦易怒、脘腹作胀、体倦乏力、便溏等脾虚肝郁症状。而且,根据降压疗效评判标准,治疗后降压有效人群的血浆中hs-CRP和IL-6水平低于降压无效人群。(2)与HF con组比较,单纯给予α7nAchR激动剂的PNU组大鼠的体重、脂肪堆积程度、脂肪细胞大小以及糖脂代谢情况均得到改善;PNU组大鼠的血压、血浆和肾脏中NE含量低于HF con组;PNU组下丘脑和脂肪组织中的α7nAchR的蛋白或mRNA表达水平增加,而IKKβ、NF-kB的蛋白或mRNA表达水平降低,同时下丘脑、血浆和脂肪组织中促炎因子IL-1β和TNF-α表达也降低;PNU组下丘脑LepRb mRNA、p-STAT3表达增加,而p-PI3K、SOCS3 mRNA、PTP1BmRNA表达降低。提示单纯给予α7nAchR激动剂可抑制肥胖大鼠中枢和外周组织炎症反应,增加瘦素信号敏感性。若联合给予α7nAchR抑制剂可削弱α7nAchR激动剂的上述作用,推断激活α7nAchR在上述效应中起到关键作用。(3)与HF con组比较,单纯给予As Ⅳ灌胃6周治疗可降低肥胖大鼠体重和脂肪堆积,减小脂肪细胞大小,改善糖脂代谢紊乱;同时As Ⅳ可降低肥胖大鼠的血压、血浆和肾脏中NE含量;升高下丘脑和脂肪组织中α7nAchR的蛋白或mRNA表达水平,抑制下丘脑和脂肪组织中的IKKβ、NF-kB蛋白或mRNA表达,减少下丘脑、血浆和脂肪组织中促炎因子IL-1β和TNF-α含量,表明As Ⅳ可增加α7nAchR表达,抑制下丘脑和脂肪组织IKKβ/NF-kB介导的炎症反应;同时,As Ⅳ治疗可增加下丘脑瘦素信号分子LepRb mRNA和p-STAT3的表达,降低p-PI3K、SOCS3 mRNA、PTP1BmRNA表达,表明As Ⅳ可提高下丘脑瘦素信号敏感性。若联合给予α7nAchR抑制剂可降低As Ⅳ的上述作用,表明As Ⅳ产生上述效应的机制之一与其上调α7nAchR表达有关。结论:(1)对于血压水平为1、2级(中国2005年指南)肥胖相关性高血压、中医辨证为肝郁脾虚证的患者,单用疏肝运脾方治疗可降低肥胖相关性高血压患者的血压,改善患者代谢异常,降低机体炎症反应程度。(2)在饮食诱导的肥胖大鼠中,激活α7nAchR可抑制下丘脑和外周脂肪组织中IKKβ/NF-kB促炎通路,减轻炎症反应和瘦素抵抗,从而抑制中枢交感神经兴奋介导的血压升高。(3)黄芪主要成分As Ⅳ可抑制下丘脑和外周脂肪组织中的IKKβ/NF-kB介导的促炎反应,减轻瘦素抵抗,发挥降低血压的作用。其作用机制之一可能与其上调下丘脑和外周脂肪组织中α7nAchR表达,增加胆碱能抗炎通路的活性有关。