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月季(Rosa hybrida)是世界上最重要的观赏花卉之一,因其美丽的花色、花形,浓郁的芳香和美丽的姿态,四季不断开花和其特有的情感内涵而倍受人们的喜爱。月季的生态适应性比较强,是城市绿化的重要材料,并且在我国各地广泛栽培。近年来,月季育种中存在着诸如遗传背景相对狭窄,传统杂交育种方法周期过长,染色体倍数和倍性差异造成远缘杂交不亲和且杂种高度不育等问题,使生物技术的发展为月季品种的改良提供了新的途径,它可以在保持品种的其他性状相对稳定的基础上,只改变外源基因所控制的性状,还能够利用其他生物的基因,这大大加速了月季育种的进程和效率。本试验以野生种大花香水月季(Rosa odorata var gigantea)、古老月季品种‘月月粉’(Rosa chinensis ’Pallida’)和现代月季品种“蜜糖”的单芽茎段为外植体,通过研究影响月季离体再生的各种因素,建立了3种月季的离体培养体系。对影响愈伤诱导和分化的各种因素进行研究,通过间接器官发生途径建立了大花香水月季和‘月月粉’的植株再生体系,并对以月季愈伤组织为受体的遗传转化体系进行了初步探讨。本研究的主要结果如下：1.建立了大花香水月季、‘月月粉’和‘蜜糖’的离体培养体系：大花香水月季和‘月月粉’腋芽萌发最适培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.12mg/L;‘蜜糖’腋芽萌发最适培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L;大花香水月季幼苗增殖最适培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.01mg/L+GA30.3mg/L,‘月月粉’幼苗增殖最适培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.01mg/L+GA30.2mg/L,‘蜜糖’幼苗增殖最适培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.01mg/L+GA30.3mg/L,3种月季材料无菌苗的最适生根培养基为1/2MS+NAA0.15mg/L,经过驯化炼苗,3种月季材料露地移栽成活率均可达80%以上。2.以3种月季的无菌苗小叶片为外植体,筛选出愈伤组织诱导的最适培养基。大花香水诱导愈伤组织的最适培养基为MS+2,4-D4.0mg/L,诱导率为93.33%；‘月月粉’诱导愈伤组织的最适培养基为MS+2,4-D3.0mg/L,诱导率为94.16%；‘蜜糖’在MS+2,4-D4.0mg/L和MS+2,4-D5.0mg/L的培养基上诱导率均可达100%,并且生长状态良好。3.愈伤组织的分化受培养基、培养条件和培养基添加物等多种因素的综合作用。通过间接器官再生途径建立了大花香水月季和‘月月粉’的植株再生体系,大花香水月季愈伤组织在MS+TDZ3.0mg/L+GA31.0mg/L+NAA0.1mg/L培养基上暗培养15d,可分化形成不定芽,分化率为18%,转移到幼苗增殖培养基上,可形成再生植株。在MS+TDZ8.0mg/L+NAA0.1mg/L培养基上暗培养15天,培养2个月后转入MS+TDZ3.0mg/L+6-BA1.0mg/L+GA31.0mg/L+NAA0.1mg/L愈伤组织分化形成体细胞胚状体,分化率为13.33%。‘月月粉’愈伤组织在MS+TDZ2.0mg/L+6-B1.0mg/L+GA31.0mg/L+NAA0.1mg/L培养基上,暗培养10d分化形成不定芽,分化率为18.67%,转移到幼苗增殖培养基上,可形成再生植株。在MS+TDZ3.0mg/L+6-BA1.0mg/L+GA31.0mg/L+NAA0.1mg/L培养基上,暗培养15d,愈伤组织分化形成体细胞胚状体,分化率为10.67%。‘蜜糖’在MS+TDZ4.0mg/L培养基上暗培养10d形成胚性愈伤组织,诱导率为20%。4.初步建立了以愈伤组织为转化受体的根癌农杆菌遗传转化体系,研究此转化体系的最佳实验参数。结果表明,大花香水月季愈伤组织侵染25min后,共培养4d,GUS瞬时表达率最高,为87.5%；‘月月粉’愈伤组织侵染15min后,共培养5d,GUS瞬时表达率最高,为55.94%；‘蜜糖’愈伤组织侵染15min后,共培养4d,GUS瞬时表达率最高,为63.34%。