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本文研究了营养成分、培养时间、温度、酸碱度、盐度、EDTA、缺铁培养对溶藻弧菌HY9901株的生长、胞外产物(Extracellular product,ECP)的分泌、胞外蛋白酶(Extracelluar produc protease，ECPase)的活性、ECP的毒性、外膜蛋白(Outermembrane protein,OMP)的表达产生的影响。
研究发现：
溶藻弧菌的最佳生长条件：细菌接种于起始pn为7.2，含2％氯化钠的TSA固体培养基，28℃培养18小时，ECPase的活性以及ECP对动物的致死率均为最大。提示在该体外培养条件下，细菌的抗原性表达最大，可用作该菌全菌灭活疫苗生产的培养条件。
ECP的电泳图谱：细菌在不同培养条件下ECP的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)图谱相似但不完全一样。温度对溶藻弧菌ECP的图谱影响最大，表现为：15℃培养时主要的ECP的相对分子量为70kDa，此条件下几乎观察不到62kaD条带；20℃和28℃同时含有ECP70kDa和62 kDa，但蛋白含量不同，ECP70kDa，在20℃时的表达量最大，28℃时ECP62 kDa的蛋白浓度最高；细菌在37℃培养下无法观察到ECP70kDa和62kD蛋白的表达。此外，培养时间对ECP的图谱也有影响。48h组和72h组均增加了97kD和74kD的表达量，72h组还增加了相对分子量为30kDa、29kDa、27kDa和25kDa条带的表达量。ECP主要蛋白对不同培养基、pH、盐度、EDTA的变化不很明显。
OMP的电泳图谱：细菌在不同培养条件下MOP的电泳图谱相似但不完全一样，但所有图谱均具有分子量为35kDa的条带。温度对溶藻弧菌MOP的图谱影响最大，表现为：45kDa OMP随着温度升高，其合成量增大，28℃时达最大值；而40kDa和34kDa OMP则随着温度的升高而减弱。培养时间对OMP的图谱也有影响，6h组的OMP电泳图谱跟其它组相比缺少分子量为27kDa的蛋白条带，但增大了25kDa条带的表达量。此外，在缺铁培养下，相对分子量为108kDa、91kDa和82kDa蛋白的表达量增加了。但是，OMP主要蛋白对不同培养基、pH、盐度、EDTA的变化不很明显。
细菌ECP和OMP的免疫原性：用免疫转印法(Western blotting)测定细菌ECP和OMP的免疫原性。结果显示细菌在不同培养条件下的ECP均具有62kDa条带被兔抗溶藻弧菌血清所识别，而OMP与兔抗溶藻弧菌血清的主要免疫反应带为45kDa和35 kDa。ECP62kDa、OMP45kDa和OMP35 kDa对环境变化不敏感，提示这些蛋白具有重要功能，可作为亚单位疫苗生产的候选蛋白，它们的最佳体外表达条件与该菌的最佳生长条件相同。培养条件对ECP毒性的影响：取不同培养基培养的细菌胞外产物进行小鼠和红笛鲷的致死试验，结果发现：不同培养温度对ECP毒性的影响最大，在不同温度培养的细菌所提取的ECP对小鼠的致死试验中，20℃组和28℃组的死亡率均为100％，37℃组对小鼠只有致病性没有致死性。随培养温度升高所提ECP对红笛鲷的致死率先升高后下降，表现为：28℃组死亡率为100％，37℃组与15℃组死亡率则只有20％。
金属螯合剂对细菌的影响：联吡啶和EDTA对溶藻弧菌生长均有抑制作用。缺铁培养下，载铁体的产量随着培养基中Fe螯合剂2，2’-联吡啶的浓度升高而升高；但胞外产物的酶活性却与联吡啶的浓度成负相关。
ECP 62kDa的毒性：通过研究电泳纯化的ECP 62kDa蛋白的酶活性和致死试验，证明ECP62kDa具有很高的酶活性和毒性。