【摘 要】
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目的:通过检测连接蛋白43(Connexin 43,Cx43)在老年性聋小鼠耳蜗中的表达以及耳蜗带状突触的变化,探究Cx43与耳蜗带状突触变化在老年性聋发生发展中的机制,为老年性聋的防治提供依据。方法:选取C57BL/6J雄性小鼠进行实验研究,分老年组、D-gal组和对照组三个组,选取16月龄C57BL/6J雄性小鼠6只作为老年组,随机选取12只3月龄C57BL/6J雄性小鼠均分为D-gal组和对
【基金项目】
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遵义市科技局基金项目(NO:遵市科合HZ字(2021)35号)
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目的:通过检测连接蛋白43(Connexin 43,Cx43)在老年性聋小鼠耳蜗中的表达以及耳蜗带状突触的变化,探究Cx43与耳蜗带状突触变化在老年性聋发生发展中的机制,为老年性聋的防治提供依据。方法:选取C57BL/6J雄性小鼠进行实验研究,分老年组、D-gal组和对照组三个组,选取16月龄C57BL/6J雄性小鼠6只作为老年组,随机选取12只3月龄C57BL/6J雄性小鼠均分为D-gal组和对照组,D-gal拟老年性聋模型鼠组采用经典D-gal衰老模型制造方法(每天颈背皮下注射5%D-gal 500mg/kg,注射时长为8周),对照组同时长每天颈背皮下注射等体积生理盐水。戊巴比妥钠联合盐酸西拉嗪进行麻醉后检测听觉脑干电位,断头处死动物,取出听泡,将耳蜗进行分离保存,扫描电镜观察耳蜗带状突触的变化,采用免疫印迹法和酶联免疫吸附测定法测定耳蜗Cx43蛋白的表达。计量资料以t检验和单因素方差分析进行分析,耳蜗Cx43蛋白表达、耳蜗带状突触宽度以及ABR阈值的相关性分析用Pearson相关分析。结果:(1)ABR阈值测量结果:老年组和D-gal组的ABR阈值较对照组明显升高(P<0.05),而老年组和D-gal组的ABR阈之间却无统计学差异(P>0.05)。(2)耳蜗带状突触电镜结果:老年组和D-gal组的耳蜗带状突触宽度较对照组明显缩小(P<0.05)。(3)Cx43蛋白表达:WB结果显示老年组和D-gal组的Cx43蛋白较对照组明显降低(P<0.05),而老年组和D-gal组的Cx43蛋白之间却无统计学差异(P>0.05);Elisa结果显示老年组和D-gal组Cx43的蛋白较对照组明显降低(P<0.05),而老年组和D-gal组的Cx43蛋白之间却无统计学差异(P<0.05)。(4)Cx43蛋白表达与听觉脑干电位ABR:3组小鼠的Cx43蛋白表达与听觉脑干电位ABR阈值之间呈负相关(r=0.74,p<0.001)。(5)Cx43蛋白表达与耳蜗带状突触宽度的相关性分析:3组小鼠的耳蜗Cx43蛋白表达与耳蜗带状突触宽度之间呈正相关(r=0.83,p<0.001)结论:(1)老年小鼠及D-gal老年性聋模型鼠的耳蜗带状突触宽度降低,提示耳蜗带状突触老化是老年性聋可能的病理机制。(2)Cx43蛋白在老年小鼠及D-gal老年性聋模型鼠的耳蜗中表达降低,且其与耳蜗带状突触宽度呈正相关,与听觉脑干电位ABR阈值呈负相关,提示Cx43蛋白可能通过介导耳蜗带状突触老化参与老年性聋的发生发展。
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