本文中我们检测体外化学合成的小干扰RNA对慢性粒细胞白血病细胞系K562的影响,以及对融合蛋白表达量的影响。构建慢病毒表达载体,为后续研究以及临床治疗提供依据。利用阳离子脂质体转染细胞,并用MTT法检转染后的细胞活性,绘制生长曲线。利用软琼脂集落形成实验定量分析细胞的克隆形成能力。用Annexin-V-FITC法检测细胞凋亡水平。用western blot检测p210bcr/abl融合蛋白表达水平的变化。利用倒置荧光显微镜检测病毒是否包装成功。siRNA转染的最适浓度为100nM。使用合适的转染试剂,转染率可达50%。转染后48h, anti-1和anti-4oligo可使实验组细胞活力降低至阴性对照组的56.5%和57.2%。转染后72h, anti-1、anti-4和阴性对照组的细胞早期凋亡率为8.08%、14.18%和4.19%,晚期凋亡以及死亡率为15.48%、9.88%和2.13%。转染后48h,与阴性对照组相比,anti-1和anti-4组的p210蛋白表达量下降。在293细胞中包装携带shRNA的慢病毒载体,转染质粒72小时后可见70%的细胞带有绿色荧光。小干扰RNA可有效降低K562细胞活性,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,阻碍细胞克隆形成并降低p210融合蛋白表达水平,为RNAi治疗慢性粒细胞白血病提供了理论依据。慢病毒载体的成功构建,为本课题搭建了研究平台,提供了新的研究手段。