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目的:
1.检测乳腺癌组织和癌旁正常组织中Survivin mRNA的表达。
2.预测Survivin基因HLA-A0201限制性CTL表位。
3.鉴定预测的表位，为肿瘤疫苗的研究提供基础。
方法:
1.Trizol法提取乳腺癌组织总RNA后，将其逆转录为cDNA，应用RT-PCR方法，检测人乳腺癌组织和癌旁正常组织Survivin mRNA的表达。
2.SYFPEITHI法为主导，结合多项式法和量化基序法，预测survivin基因的HLA-A2限制性CTL表位，获得较为理想的九肽和十肽作为候选表位。
3.借助于流式细胞技术，通过T2细胞一肽结合力实验和ELISPOT检测法对所筛选的表位进行体外鉴定。
结果:
1.乳腺癌组织的Survivin mRNA的表达率和表达量均明显高于癌旁正常组织，两者差异有统计学意义(P<0.05)。
2.预测得到的4个候选表位STFKNWPFL(2～28)，LPPAWQPFL(6～14)，ELTLGEFLKL(95～104)和FLKDHRISTF(13～22)中只有ELTLGEFLKL(95～104)通过体外鉴定。
结论:
1.Survivin mRNA在乳腺癌组织中呈高表达。
2.ELTLGEFLKL(95～104)是Survivin的HLA-A0201限制性CTL表位。