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人牙髓细胞（humandentalpulpcells，hDPCs）在受到适当的刺激后，可通过增殖、迁移和成牙本质细胞分化而形成修复性牙本质。牙髓对损伤的应答和修复性牙本质的形成是一个复杂的生物学过程，涉及牙髓细胞（Dentalpulpcells，DPCs）的增殖、迁移、成牙本质细胞分化和牙本质基质的形成与矿化。然而，hDPCs增殖和成牙本质细胞分化的机制仍不清楚。高迁移率族蛋白B1（High-mobilitygroupbox1protein，HMGB1）属高迁移率族蛋白家族成员，是一种DNA结合蛋白，能适当的调节转录因子和DNA重组及修复。还具有多种生物学效应，HMGB1还可作为细胞外信号分子，调节炎症反应和组织再生。有研究发现在心肌梗死后的心肌组织再生中，HMGB1能诱导心肌前体细胞的增殖和分化；HMGB1能以自分泌或旁分泌的形式参与骨骼肌损伤后的组织再生；HMGB1可通过促进皮肤成纤维细胞的增殖和迁移，促进皮肤伤口的愈合；HMGB1还在大鼠神经前体细胞的增殖和向神经细胞分化中发挥重要作用。牙齿发育过程中，HMGB1在矿化区域中的成釉细胞和成牙本质细胞中高表达，提示HMGB1可能参与了牙齿的矿化。因此，探讨HMGB1与hDPCs的增殖、迁移和分化的关系具有重要意义。目的检测HMGB1在人牙髓组织和牙髓细胞中的表达，并采用体外培养的hDPCs为实验模型，以HMGB1作为细胞外刺激因子，研究HMGB1与hDPCs的增殖、迁移和分化的关系。方法采用组织块法体外原代培养hDPCs；免疫组化法和免疫荧光法分别检测HMGB1在牙髓组织和牙髓细胞中的表达情况，流式细胞术定量检测hDPCsHMGB1的表达率；以不同浓度的HMGB1作为细胞外刺激因子，通过CCK-8试剂盒检测HMGB1对hDPCs的增殖效应，并通过细胞划痕实验初步探究HMGB1对hDPCs迁移能力的影响；hDPCs矿化诱导后，检测牙髓细胞碱性磷酸酶活性及矿化结节形成情况，荧光定量PCR和WesternBlot检测牙本质涎磷蛋白（Dentinsialophosphoprotein，DSPP）、牙本质基质蛋白（Dentinmatrixprotein-1，DMP-1）、碱性磷酸酶（Alkalinephosphatase，ALP）以及HMGB1和晚期糖基化终产物受体（Receptorforadvancedglycationendproducts，RAGE）的表达情况，采用细胞免疫荧光和WesternBlot分别检测矿化过程中不同时间点HMGB1在hDPCs细胞核和细胞质的分布以及蛋白表达水平，采用ELISA试剂盒检测不同时间点上清中HMGB1的含量；在hDPCs的矿化过程中，以适宜浓度HMGB1刺激细胞后，荧光定量PCR和WesternBlot检测DSPP、DMP-1、ALP以及RAGE的表达情况。结果组织块法原代培养hDPCs切实可行；HMGB1在人牙髓组织和hDPCs细胞核中表达，适宜浓度的HMGB1可促进hDPCs增殖和迁移；在hDPCs的矿化诱导中，HMGB1的mRNA水平上调，且从细胞核转位至细胞质，并主动分泌至细胞外；HMGB1可促进矿化结节的形成，并上调hDPCs的ALPase活性，以及DSPP、DMP-1、ALP及RAGE的mRNA和蛋白质水平。结论本研究发现HMGB1在人牙髓组织和约98%的hDPCs细胞核中表达。HMGB1与hDPCs的成牙本质细胞分化相关，在矿化过程中，HMGB1可从hDPCs细胞核转位至细胞质，并分泌至细胞外。适宜浓度HMGB1刺激hDPCs后，可能通过受体RAGE，促进细胞增殖、迁移和分化。