【摘 要】
：
Ezrin是连接细胞膜与细胞骨架的一种蛋白,在细胞膜重塑、细胞迁移、细胞增殖、细胞信号传导和细胞形态的维持等多种生命活动均起到重要调节作用。磷酸化修饰是调控ezrin活性
论文部分内容阅读
Ezrin是连接细胞膜与细胞骨架的一种蛋白,在细胞膜重塑、细胞迁移、细胞增殖、细胞信号传导和细胞形态的维持等多种生命活动均起到重要调节作用。磷酸化修饰是调控ezrin活性最重要的机制。目前已鉴定的调节ezrin功能的磷酸化位点有7个。已有的研究表明睾丸内有ezrin表达,并参与了哺乳动物精子发生与获能等过程。但睾丸内ezrin表达有何规律?发生了哪些修饰?这些修饰又与精子发生及获能有何关系?目前尚无确切论断。本试验以ICR鼠为研究对象,应用免疫荧光染色技术及荧光定量PCR技术对不同发育阶段的公鼠睾丸以及不同发育时期育精子ezrin的表达水平进行分析,总结其对小鼠精子发育尤其对精子获能产生影响的作用规律,为阐明ezrin对哺乳动物精子发生的分子机制奠定一定的基础。研究主要分为三部分：1.Ezrin蛋白在小鼠睾丸中的定位在小鼠生精的时间基础上,取1w龄(性成熟前)、7w龄(性成熟)及17w龄(成年期)公鼠的睾丸,进行间接免疫荧光染色及免疫组织化学染色,分析ezrin在小鼠睾丸内的定位规律,两者结果均显示：性成熟前ezrin主要定位于小鼠睾丸间质细胞,性成熟后ezrin不仅定位在间质细胞,生精小管内的精子细胞也有部分着色,到成年期,可以明显的看到生精小管内的着色加深,着色的区域范围更广。2.小鼠睾丸中ezrin表达规律分别从1w、7w及17w龄公鼠的睾丸提取总RNA进行反转录,应用荧光定量PCR技术分析小鼠不同性生理年龄睾丸内ezrin mRNA表达水平,结果显示：性成熟前小鼠睾丸ezrin mRNA的表达水平稍高于达性成熟后,随着年龄的增长,到达成年期‘rzrin mRNA的表达水平又逐渐升高。3.小鼠附睾头内精子细胞中Ezrin蛋白的表达及修饰取性成熟公鼠的附睾头,释放出精子细胞,经未获能及获能处理后,取适量涂与多聚赖氨酸处理的载玻片上,自然晾干,并固定后,分别以兔抗Ezrin多克隆抗体、p-Ezrin(Y354)及p-Ezrin(T567)抗体进行间接免疫荧光染色方法检测经获能处理前后Ezrin蛋白的表达及磷酸化修饰水平的变化,结果发现：附睾头内的精子有Ezrin蛋白的表达,且在获能前后Ezrin蛋白Y354及T567均发生了磷酸化修饰。4.小鼠附睾尾内成熟精子中Ezrin蛋白的表达及修饰取性成熟公鼠附睾尾,释放出精子,经获能及未获能处理后,取适量涂与多聚赖氨酸处理的载玻片上,自然晾干,并固定后,以间接免疫荧光染色方法,检测获能前后野生型及磷酸化型Ezrin蛋白表达水平的变化,结果发现：(1)附睾尾内的精子有Ezrin蛋白的表达,且在精子获能后表达量下降；(2)附睾尾内精子获能前后均有Ezrin蛋白发生Y354发生磷酸化修饰,且获能后Y354磷酸化修饰程度显著高于未获能组；(3)附睾尾内精子获能前后均有Ezrin蛋白发生T567发生磷酸化修饰,且获能后T567磷酸化修饰程度显著高于未获能组.
其他文献
摘要：义务教育阶段英语课程的总目标是通过英语学习是学生形成初步的综合语言运用能力，促进心智发展，提高综合人文素养。在英语学习中，很多学生不知道如何提问，如何用提问来提高自己学习英语的能力。而乐问、敢问、善问、勤问是学习的重要方法，如何让学生在“问”中快乐学习英语，这本身就是一门学问。在英语教学过程中，往往教师提出问题后，很多学生不由自主的低着脑袋以示我不会回答，让课堂教学步步维艰。如何让“问”不再
摘要：思想教育不仅体现在品德和法制学科，数学的教学中也同样处处存在，所以在小学数学教学的阶段里更需要结合数学对学生进行良好的思想教育渗透，并充分利用。从而培养学生的爱国主意、集体主义、热爱社会主义、遵守法律和社会公德，树立正确的人生观奠定基础。 关键词：小学数学 思想教育 渗透 一、发挥教师在教学中体现人格魅力，感染学生。 思想品德教育就是说理、训练的过程，也是情感陶冶和潜移默化的过程。教师
摘要：在中学英语教学中，理解情感的本质，善于创设情景并挖掘教材中的情感教育内容，注重对教学情感的加工；建立和谐的师生关系，利用好英语课堂，搭建互动、合作的交流平台，激发学生学习英语的兴趣和热情，真正实现知识和情感的统一发展，以情优教，以情促知。 关键词：情感教育 互动合作 英语教学 常言道：“感人心者，莫先乎情。”著名学者朱小蔓教授认为：“情绪、情感是人类精神生活最重要的组成部分，是人类经验中
摘要：德育教育是小学英语教学的主要内容之一，全面实施德育教育是每个教师在教学中不可忽视的重要课程 。把德育教育渗透到课堂教学中，促进学生的全面发展，让学生充分地认识自我价值，积极发展学生的主动性，真正体现了以学生为主体的教学模式。 关键词：德育渗透 兴趣激发 快乐学习 过去的教学常常强调教师的主导性而把学生单纯地视为教育对象，忽视学生的主体地位；把学生的头脑看作是可以填充知识的容器，忽视教学特
摘要：充分发挥学生的主体地位，注重学生互助、合作交流，建立民主、平等的师生关系，用心与学生沟通，用爱去和学生交流，赢得学生的信任和热爱，真正的心对心的走近学生的心灵，这样才能提高课堂效率，打造出真正的高效课堂。 关键词：合作交流 激发欲望 走进心灵 在减负背景下，讲究课堂教学的优质高效性是师生共同的追求目标.在减负教育新政的课改形势下，提高课堂教学质量的主阵地势必落到课堂上来，因此，王建校长为
摘要：近几年来，中学作文教学改革方面的一个重要变化是，对学生作文的批改由传统的个别式书面批语转移到重视作文中带普遍性问题的集中评讲。评改方面的这一转变，对于解决学生作文中表现出来的共同性问题无疑是有很大意义的。但是，有的教师因而就舍弃了对学生习作的个别性批改，这显然是不对的。对于学生这样一些具有独立思想的个体来说，集体批语这种形式在某种程度上会打击学生的写作积极性，会破坏他们的写作热情，从而使学生
我国的学生与国际上其他国家的学生相比，出现的问题是创新能力不足，独立性差，”应该说，这一评价是切中时弊的。那么我们的学生创新精神和创造能力是如何失去的呢？这当然从教育本身找根源。学生学习负担沉重，教师教学形式单调，磨灭了学生学习的兴趣和对数学现象的好奇心，机械模仿式的题海战术，泯灭了学生的创造性思维。可见，解决问题的关键是教育内容的更新、教育观念的更新和教学方法的改革。在教学内容没有根本改观的情况