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本论文采用UPLC-MS/MS方法对人体血清和尿液中的代谢产物进行定量分析,并探讨了它们与两种癌症的相关性,这在医学上对癌症的早期诊断和治疗、减轻患者身体心理上的痛苦和经济压力都具有十分重要的意义。首先,建立了测定人体尿液中DNA氧化损伤标志物8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的UPLC-MS/MS分析方法。尿样经HLB固相萃取柱净化,以正离子电喷雾离子源和多反应监测模式进行分析。8-OHdG的线性范围在1-300 nmol/L之间。LOD和LOQ分别为0.2和0.6 nmol/L,样品的日内精密度为0.7%-1.1%,日间精密度为0.5%-0.7%。8-OHdG的回收率在99.8-111.4%之间。此外,应用建立的方法检测了65例正常人(吸烟与非吸烟者分别为21和44例)和61例结直肠癌患者(吸烟与非吸烟者分别为17和44例)尿液中8-OHdG含量,发现吸烟者和结直肠癌患者的8-OHdG含量明显高于对照组。其次,对血清样品里的蛋白质进行沉淀处理,利用稳定同位素标记的方法在负离子电离多反应监测模式下检测了甘胆酸(GCA)的含量。GCA的校准曲线覆盖浓度范围从0.2到400 ng/ml;LOD和LOQ分别为0.01 ng/mL和0.05 ng/mL,考察了该方法日内(2.3-6.1%)和日间(2.4-4.6%)精密度和回收率(103.7-114.3%)。建立的方法已成功应用于32名健康志愿者,10名肝细胞肝癌患者和14名其他癌症患者的血清中GCA测定,肝癌患者的血清中GCA水平较高,健康对照组与其他癌症组之间GCA水平无明显差异。最后,开发建立了同时测定人体尿液中DNA、RNA甲基化和羟甲基化的代谢产物:5-甲基胞苷(5-mrC)、5-甲基-2’-脱氧胞苷(5-mdC)、5-羟甲基-2’-脱氧胞苷(5-hmdC)、5-羟甲基胞苷(5-hmrC)的UPLC-MS/MS分析方法。首先,采用MCX固相萃取柱对尿液中的4种胞苷类代谢产物进行富集净化提取;然后优化了UPLC流动相中添加剂的种类。在流动相中添加0.06 mmol/L的苹果酸,使得5-hmrC信号提高了9.4倍,在人体尿液中首次定量检测到5-hmrC。线性范围在0.1-100.0nmol/L,日内精密度在0.5%-2.6%的范围内,日间精密度在0.2%-1.4%之间,测得回收率在91.9%-115.8%之间。最后对90名结直肠癌患者和90名健康志愿者的尿样进行测定,与健康对照组相比,结直肠癌患者尿中5-mdC、5-hmdC、5-mrC和5-hmrC的水平显著降低。