视网膜色素上皮细胞(Retinal pigmented epithelium,RPE)的功能紊乱、变性和凋亡可造成视网膜内环境的恶化,进而引起光感细胞的凋亡,最终导致退行性视网膜疾病的发生,使患者视力下降,甚至失明。但迄今为止,依然没有有效的治疗手段来治愈这些疾病。而近期临床试验表明,细胞治疗有望成为该类退行性视网膜疾病的治疗方法。其中,人胚胎干细胞(Human embryonic stem cell,hESCs)是一类能无限增殖和分化成所有三胚层细胞的细胞群体,而hESCs诱导分化获得的RPE(h ESCs-RPE)被认为是细胞移植治疗的最佳种子细胞。并且动物模型实验和临床试验结果显示,hESCs-RPE在体内具有很好的安全性,不存在致瘤和引起其它不良反应的风险,并且对视力的恢复具有一定的效果。但是,现有的hESCs-RPE培养体系,往往使用滋养层(feeder)和含有胎牛血清(Fetal calf serum,FBS)等动物源性或成分不明确成份。为hESCs-RPE的临床应用带来了污染的潜在风险和高昂的培养成本。而建立无动物源性培养体系,将有利于人们对RPE生长机制的研究和今后对hESCs-RPE相关细胞制剂的规模化、商品化生产。本文通过无滋养层feeder、无血清体系培养的hESCs。并利用免疫荧光染色,核型分析,流式细胞仪等技术手段检测hESCs的形态与多能性表达情况。hESCs经过7天的培养后,克隆块基本融合。此时,将原有的hESCs培养液更换为RPE分化培养液,利用自分化方法进行RPE诱导分化。再经过纯化、传代之后获得较纯的RPE样细胞。之后,我们利用免疫荧光染色、RT-PCR、扫描电子显微成像、核型分析等技术对hESCs分化获得的RPE细胞进行形态特征鉴定。并利用细胞吞噬实验检测hESCs-RPE是否具有吞噬功能。该无动物源性体系符合临床要求,为后续实验提供了“种子”细胞。利用无feeder无血清体系下自分化获得的hESCs-RPE,可为国内hESCs-RPE相关临床研究提供参考。