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肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)是我国重要的恶性肿瘤,居农村和城市恶性肿瘤死亡原因的第一和第二位。HCC的发生受环境因素、病毒因素和机体的遗传因素等的综合影响。在我国,乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)慢性感染是HCC发生的主要原因。我国HBV感染者占全世界1/3,但是HCC发病数占全球50%以上,此外,HCC的发生与HBV慢性感染导致的肝脏慢性炎症相关,但是多数的慢性肝炎患者终身并没有发生HCC,这提示我们中国人遗传易感性在HCC发生发展中发挥重要作用。PTEN (Phosphatase and tensin homologue deleted Chromatosome10, PTEN)为人10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因,是人类发现的第一个具有双重特异性磷酸酶活性的抑癌基因。PTEN多态性与多种肿瘤有关,另外,研究发现HBX表达可调节PTEN的转录活化,促进AKT的磷酸化,从而促进肿瘤生长增殖,抑制肿瘤细胞的凋亡。HBX在肝癌中起着重要的作用,因此探讨PTEN多态性与HBV变异在HCC中的交互作用更有意义。目的：研究PTEN多态性(rs1234220,rs2299939,rs1234213)与HCC易感性之间的关系,以及分析PTEN多态性与HCC相关HBV变异在乙肝阳性HCC发生发展中的交互作用,揭示HCC发生的遗传和病毒危险因素,为我国HBV相关HCC危险因素预防以及预测HCC的发生提供理论依据。方法：本研究使用荧光探针实时定量PCR法对1012例健康对照、302例HBV自然清除者、990例非肝癌HBV感染者(316例ASCs、316例CHB、358例LC)及1021例HCC患者的PTEN基因的单核苷酸多态性位点进行基因型检测。Hardy-Weinberg遗传平衡检验在Internet上进行(http://ihg.gsf.de/ihg/snps.html)使用SPSS16.0软件进行数据的录入与分析,应用独立样本t检验、方差分析、χ2检验和非条件Logistic回归模型分析PTEN基因多态性与HBV慢性感染或HCC的关系及其与HBV变异在HCC中的交互作用。结果：1.PTEN多态性位点与HBV慢性感染或HCC的关系(1)以健康人群为对照,rs1234220CT基因型、C等位基因(CT+CC)显著增加HCC的发生风险(AOR=1.37,95%CI=1.08-1.73;AOR=1.35,95%CI=1.07-1.69)。以非肝癌HBV感染者为对照,rs1234220CT基因型、C等位基因(CT+CC)显著增加HCC的发生风险(AOR=1.28,95%CI=1.02-1.61；AOR=1.27,1.01-1.57),rs2299939GT基因型、T等位基因(GT+TT)能降低HCC的发生风险(AOR=0.75,95%CI=0.62-0.92；AOR=0.79,95%CI=0.65-0.96)。以所有非HCC者作为对照,rs1234220CT基因型、C等位基因(CT+CC)显著增加HCC的发生风险(AOR=1.30,95%CI=1.08-1.56；AOR=1.29,1.07-1.54),rs2299939GT基因型能降低HCC的发生风险(AOR=0.84,95%CI=0.71-0.99)。(2)按性别分层后：在男性中与健康对照比较,rs1234220CT基因型、C等位基因(CT+CC)显著增加HCC的发生风险(AOR=1.35,95%CI=1.04-1.75；AOR=1.33,95%CI=1.03-1.71)。与非肝癌HBV感染者比较,rs1234220CT基因型、C等位基因(CT+CC)显著增加HCC的发生风险(AOR=1.31,95%CI=1.01-1.70；AOR=1.30,95%CI=1.01-1.67),rs2299939GT基因型、T等位基因(GT+TT)能降低HBV相关HCC的风险(AOR=0.72,95%CI=0.57-0.90；AOR=0.76,95%CI=0.62-0.95)。与所有非肝癌者比较,rs1234220CT基因型、C等位基因(CT+CC)显著增加HCC的发生风险(AOR=1.30,95%CI=1.06-1.60; AOR=1.29,95%CI=1.06-1.58),rs2299939GT基因型能降低HBV相关HCC的风险(AOR=0.81,95%CI=0.68-0.98)。在女性中PTEN的三个多态性位点各基因型频率在健康对照、HBV自然清除者、非HCC的HBV感染者、所有非HCC对照者与HCC之间的差异没有统计学意义。(3)在所有乙肝病毒感染者中,rs2299939T等位基因(GT+TT)与高水平的ALT有关(AOR=1.26,95%CI=1.01-1.57), rs2299939GT基因型、T等位基因(GT+TT)均与高浓度的HBV DNA有关(AOR=1.33,95%CI=1.06-1.67; AOR=1.29,95%CI=1.03-1.60)。在男性乙肝病毒感染者中rs2299939GT基因型、T等位基因(GT+TT)与高水平的ALT (AOR=1.35,95%CI=1.04-1.75; AOR=1.36,95%CI=1.06-1.74)有关,与高浓度的HBV DNA(AOR=1.38,95%CI=1.07-1.78;AOR=1.29,95%CI=1.01-1.66)有关。PTEN的3个多态性位点均与HBV慢性感染无关。(4)按基因型分层后,在HBV基因型B中,以非HCC乙肝病毒感染者(ASCs、 CHB、LC)作为对照,rs1234220CT基因型、C等位基因(CT+CC)能够增加HCC发生的风险(AOR=2.02,95%CI=1.14-3.59; AOR=2.02,95%CI=1.14-3.59),但是这可能是因为样本量较少有关,需增加样本量进行验证。(5)按HBeAg的状态分层后,在HBeAg阴性中与非肝癌HBV感染者比较,rs2299939GT基因型、T等位基因(TC+TT)能降低HCC的发生风险(AOR=0.68,95%CI=0.53-0.87；AOR=0.72,95%CI=0.57-0.92)。2.PTEN多态性与HBV变异及基因型之间的交互作用(1)rs1234220多态性与HBV变异的交互作用：分别以rs1234220TT以及A1762T/G1764A、A3054T、C3116T的野生型为对照,经年龄、性别校正后,发现：A1762T/G1764A的单独作用能增加HCC的发病风险(AOR=3.71,95%CI=2.69-5.11), rs1234220C(CT+CC)与A1762T/G1764A共同作用在HBV感染者中显著增加HCC的发病风险(AOR=2.44,95%CI=1.93-3.07)。但是rs1234220多态性与A1762T/G1764A、A30541、C3116T之间不存在交互作用。按性别分层后得到的结果与总体一致。(2)rs2299939多态性与HBV变异的交互作用：分别以rs2299939GG及A1762T/G1764A、A3054T、C3116T的野生型为对照,经年龄、性别校正后,A1762T/G1764A、C3116T的单独作用能增加HCC的发病风险(AOR=3.55,95%CI=2.48-5.08; AOR=2.17,95%CI=1.42-3.32); rs2299939T(GT+TT)与A1762T/G1764A共同作用能增加HCC的发病风险(AOR=1.70,95%CI=1.39-2.08)；A3054T为野生型时,rs2299939T(GT+TT)的单独作用能降低HCC的发病风险(AOR=0.62,95%CI=0.44-0.87)。但是,rs2299939多态性与A1762T/G1764A之间不存在交互作用,rs2299939多态性与A3054T的交互作用能增加HCC的发病风险(AOR=2.41,95%CI=1.08-5.35),rs2299939多态性与C3116T的交互作用能降低HCC的发病风险(AOR=0.34,95%CI=0.18-0.66)。按性别分层后,仅在男性中rs2299939多态性与C3116T之间存在交互作用。(3)rs1234213多态性与HBV变异的交互作用：分别以rs1234213CC及A1762T/G1764A、A3054T、 C3116T的野生型为对照,经年龄、性别校正后,发现A1762T/G1764A的单独作用能增加HCC的发病风险(AOR=3.95,95%CI=2.23-7.01),C3116T的单独作用能降低HCC的发病风险(AOR=0.51,95%CI=0.27-0.97)。但是rs1234213多态性与A1762T/G1764A、A3054T之间不存在交互作用,rsl234213多态性与C3116T之间的交互作用显著增加HCC的发病风险(AOR=3.68,95%CI=1.74-7.76)。按性别分层后,仅在男性中rs1234213多态性与C3116T之间存在交互作用。(4)乙肝病毒基因型与PTEN多态性的交互作用：以HBV B基因型及rsl234220TT、rs2299939GG、rs1234213CC为对照,经年龄、性别校正后,发现HBVC基因型分别与rs1234220C(CT+CC)、rs2299939T(GT+TT)、rs1234213T(CT+TT)共同作用显著增加HCC的发病风险(AOR=1.68,95%CI=1.38-2.05；AOR=1.32,95%CI=1.10-1.60；AOR=1.29,95%CI=1.01-1.66),HBV基因型为B时,rs1234220C(CT+CC)的单独作用能增加HCC的发病风险(AOR=2.02,95%CI=1.14-3.59)；rs1234220TT时,HBVC基因型的单独作用显著增加HCC的发病风险(AOR=2.37,95%CI=1.72-3.28)；rs2299939GG时HBV C基因型的单独作用显著增加HCC的发病风险(AOR=2.11,95%CI=1.47-3.01)。但是PTEN多态性与HBV基因型之间在肝细胞癌发生发展中不存在交互作用。3. PTEN单倍型与HCC的关系与健康对照相比,rs1234220C-rs2299939G-rs1234213T单倍型显著增加HCC的发生风险(AOR=1.32,95%CI=1.06-1.63)。结论：1.rs1234220CT基因型、C等位基因(CT+CC)显著增加HCC的发生风险,rs2299939GT基因型显著降低HCC的发生风险。在男性中也得到相同的结果。PTEN的3个多态性位点均与HBV慢性感染无关。2.在HBV基因型B中,rs1234220CT基因型、C等位基因(CT+CC)能够增加HCC发生的风险,但需要更大的样本量进行验证。3.在HBeAg阴性中rs2299939GT基因型、T等位基因(GT+TT)能降低HCC的发生风险。4.rs2299939多态性与A3054T、 C3116T之间在HCC发生发展中存在交互作用,在男性中rs2299939多态性与C3116T之间存在交互作用。5.在总体和男性中,rs1234213多态性与C3116T之间在HCC发生发展中存在交互作用。