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目的:(1)观察树莓提取物预防大鼠原发性肝癌的效果及形态学变化;(2)寻找树莓预防大鼠原发性肝癌的特异性蛋白质靶点。
方法:利用黄曲霉毒素B1(AFB1)和二乙基亚硝胺(DEN)建立大鼠原发性肝癌动物模型;通过大体观察和免疫组织化学方法研究树莓提取物对于大鼠原发性肝癌的预防效果和形态学变化:利用血清蛋白质组学差异分析寻找树莓预防原发性肝癌的差异蛋白质峰。
结果:树莓干预组大鼠原发性肝癌成瘤率明显低于空白对照组。大体所见,树莓干预组大鼠肝脏上的瘤径变小,瘤的数量减少,成瘤率减低,结节程度减轻;HE染色也可以明显看到高剂量树莓干预组大鼠仅部分肝细胞出现中度异型性,而空白对照组致癌率为100%:免疫组化观察结果:随着树莓提取物浓度的增加,大鼠肝癌细胞PCNA阳性细胞表达数逐渐降低,高剂量树莓干预组明显低于空白对照组(P<0.05);TUNL实验结果显示:随着树莓提取物浓度的增加,树莓干预组大鼠肝癌细胞凋亡细胞数逐渐升高,高剂量树莓干预组明显多于空白对照组(P<0.05);蛋白质组学差异分析:成瘤组大鼠血清在蛋白质峰2597.93M/Z,4513.88M/Z上与高剂量树莓干预组大鼠血清具有显著性差异(P<0.05)。
结论:树莓提取物可以抑制肝癌细胞PCNA的表达,从而抑制肝癌细胞的增殖;还可以诱导肝癌细胞凋亡,最终抑制肝癌发生发展。树莓中植物化学物质可能在抑制肝癌发生、发展中起决定性作用;大鼠血清蛋白质峰2597.93 M/Z,4513.88 M/Z所代表的蛋白,极有可能为树莓预防肝癌的蛋白质作用靶点。