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目的:本文通过构建具有p H敏感性、肿瘤细胞靶向及胞内线粒体定位的二级靶向的多功能脂质体,以期实现药物对肿瘤组织的主动靶向、快速释放以及激活线粒体凋亡通路等作用,从而增强抗肿瘤效果。同时对所构建的脂质体的体外及体内抗肿瘤效果进行考察。方法:本文首先通过三苯基膦(Triphenylphosphine,TPP)修饰白藜芦醇(Resveratrol,RSV)合成了三苯基膦-白藜芦醇(TPP-RSV),并采用TLC、1H NMR、13C NMR等方法对产物进行结构确认和表征。合成了DSPE-PEG350、DSPE-PEG2000及DSPE-PEG2000-Tf等功能性膜材,并对目标产物进行结构确认和表征。然后,采用薄膜分散法、后插入法、硫酸铵梯度法制备不同功能化的脂质体,并通过粒径、电位、透射电镜(TEM)、体外p H敏感性以及体外释放等方面考察所制备脂质体的性质。选择人乳腺癌细胞(MCF-7)和人乳腺癌耐阿霉素细胞(MCF-7/ADR)为模型细胞,通过细胞毒性、细胞凋亡以及线粒体相关实验(线粒体膜电位、细胞凋亡蛋白酶3和9)等对脂质体体外抗肿瘤活性进行考察。最后通过小动物活体成像技术及体内的抑瘤活性实验,评价了脂质体体内靶向性和抗肿瘤作用。结果:本文成功合成了TPP-RSV、DSPE-PEG及DSPE-PEG2000-Mal等化合物。所制备的脂质体粒径低于200 nm,形态圆整,分布均一,电位在-30 mv至-40 mv之间,具有很好的稳定性。体外p H敏感性结果显示5%PEG350与0.2%PEG2000(mol%)修饰的脂质体具有明显的p H响应性,同时脂质体的体外释放也呈现明显的p H依赖性。各种空白脂质体对肿瘤细胞均无毒,表明脂质体具有良好的生物相容性。包载TPP-RSV脂质体的IC50值显著性的低于同时包载TPP/RSV的脂质体(P<0.001),而同样包载TPP-RSV,转铁蛋白(Transferrin,Tf)修饰的p H敏感脂质体的细胞毒性比未经Tf修饰的明显提高(P<0.01),表明Tf能够显著的提高肿瘤细胞对脂质体的摄取。细胞对p H敏感Tf修饰的脂质体的内吞以网格蛋白介导为主。细胞凋亡结果与线粒体相关实验结果显示,TPP-RSV能够显著的在线粒体内靶向蓄积,激活线粒体凋亡通路。体内实验结果显示,Tf能够增加肿瘤细胞对脂质体的摄取,提高肿瘤细胞内药物浓度,同时联合包载TPP-RSV与DOX可以在低给药剂量下实现较高抑瘤效果。结论:本文成功构建了联合包载TPP-RSV/DOX多功能靶向给药脂质体。所制备的脂质体形态圆整,粒径均一且体外释放呈现良好的p H敏感性。体外抗肿瘤实验结果显示,主动靶向p H敏感脂质体具有较高的优势。动物体内抑瘤活性实验表明联合包载TPP-RSV/DOX的p H敏感脂质体可以增强在低给药剂量时的抑瘤效果。总之,该多功能靶向给药系统用于癌症的治疗具有广阔的前景。