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背景乙醛脱氢酶2(ALDH2)是人体内代谢乙醛的关键酶,近年来大量研究表明ALDH2对心血管系统具有保护作用,可降低冠心病、高血压、心功能不全的发生等,但具体机制尚不明确。目的本研究分别从人群临床研究及细胞基础实验两个层次深入探讨ALDH2在动脉粥样硬化(AS)进展中的作用,明确ALDH2延缓AS的作用机制。方法在临床研究中,纳入解放军总医院心内科拟诊为冠心病的连续住院患者为受试者,共248例。根据ALDH2基因型检测结果将患者分为2组：ALDH2野生型(ALDH2-wt)和ALDH2突变型(ALDH2-m)。收集患者基线临床资料,记录血脂水平(包括甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),载脂蛋白A1 (apoA1),载脂蛋白B(apoB)),超敏C反应蛋白(hsCRP),同型半胱氨酸(hcy)等化验结果,根据冠状动脉造影结果计算Gensini积分。采集患者血液,收集上清,应用ELISA法检测4-羟基壬烯醛(4-HNE)含量。细胞水平实验中,分离成年大鼠主动脉,提取并培养平滑肌细胞,给予氧化低密度脂蛋白(ox-LDL) 150μg/ml模拟AS环境,分为正常对照组,ox-LDL组,Alda-1 (ALDH2激活剂)+ox-LDL组,Daidzin (ALDH2抑制剂)+ox-LDL组。应用Western blot方法检测内质网应激相关的蛋白,如葡萄糖调节蛋白78(GRP78),蛋白激酶R样内质网激酶(PERK),磷酸化真核细胞翻译起始因子(p-eIF2a),转录激活因子4(ATF-4),CEBP同源蛋白(CHOP),4-羟基壬烯醛(4-HNE)等含量。流式细胞学技术,TUNEL染色检测凋亡的细胞比例,CCK-8检测细胞活性。结果1、共纳入ALDH2-wt患者164例,ALDH2-m患者84例,两组基线临床资料中,ALDH2-wt组患者较ALDH2-m组相比,仅饮酒史差异有统计学意义(26.20%vs7.10%,P<0.001),其他临床指标差异均无显著性意义。2、与ALDH2-wt组患者相比,ALDH2-m组患者的冠状动脉支架植入总数(1.34±1.60 vs 0.89±1.29,P<0.05)以及冠状动脉狭窄程度的Gensini积分(33.12±33.39 vs23.43±24.47,P<0.05)均明显增高。3、Logistic回归分析提示ALDH2突变型基因(OR=2.295)及高血压病史(OR=3.241)为冠心病的独立危险因素。4、ELISA结果显示ALDH2-m组患者血清中4-HNE水平较ALDH2-wt组患者明显升高(20.43±5.87 vs14.47±5.16,P<0.05)。5、细胞水平的Western blot结果显示动脉平滑肌细胞中GRP78, PERK, p-eIF2a, ATF-4, CHOP,4-HNE蛋白水平在ox-LDL组表达明显升高,而ALDH2激活剂Alda-1干预组中以上内质网应激相关蛋白表达明显降低,但是加入ALDH2抑制剂Daidzin后以上内质网应激相关蛋白较ox-LDL组明显增高,存在叠加损伤效应。6、流式细胞学技术、TUNEL、CCK-8检测结果显示oxLDL组的细胞凋亡比例明显增加,Alda-1干预后凋亡细胞减少,增殖增加,经Daidzin处理后凋亡细胞较oxLDL组明显增加。结论1、与ALDH2-wt患者相比,ALDH2-m组的冠状动脉狭窄程度更为严重。2、ALDH2-m是冠心病的独立危险因素。3、ALDH2-m冠心病患者中4-HNE的清除能力下降,提示存在内质网应激。4、ALDH2可通过抑制内质网应激的发生,减少其导致的细胞凋亡,进而抑制AS的进展。