应用蒸馏水局部冲洗预防腹膜后入路肾癌意外破裂致肿瘤种植的研究

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目的:术前及术中肿瘤意外破裂会造成大量肿瘤细胞肾周播散,从而引起种植转移的的风险,蒸馏水灌洗所形成的低渗作用可以杀死癌细胞,并已有报道用于膀胱癌手术中,但对于肾癌手术是否有价值尚无报道,本文将探讨应用蒸馏水局部冲洗对预防腹膜后入路肾癌意外破裂的临床意义。材料和方法:1.细胞实验:将对数期生长的786-0及769-P肾癌细胞系在蒸馏水及生理盐水中培养,显微镜(40倍、400倍)下动态观察的细胞形态及细胞数目变化;2.再培养实验:肾癌细胞接种于蒸馏水3min、5min、10min、15min及生理盐水15min后,再次分离,获取肾癌细胞,使肾癌细胞充分悬浮配好的RPMI-1640培养液中,接种于25cm的培养瓶中,再培养48小时,观察细胞生长状态,验证蒸馏水对肾癌细胞的毒性作用。3.临床资料分析:采用回顾性队列研究方法对我院泌尿外科2010.01-2017.12因肾肿瘤自发破裂及术中肿瘤意外破裂行后腹腔入路手术的34例患者临床资料进行统计分析。研究采集的信息包括:患者年龄、性别、手术方式、肿瘤病理类型、Furman分级、病理分期、术中是否应用蒸馏水进行冲洗、术中出血量及肿瘤大小等,根据2014年中国泌尿外科疾病诊断治疗指南推荐的随访内容对患者进行随访。采用SPSS 22.0统计软件对数据进行统计分析,我们应用log-rank检验对影响患者无病生存期及总生存期的各个因素进行单因素分析,Kaplan-Meier生存曲线法绘制生存曲线图,采用多因素cOx 比例风险模型对影响患者无病生存期及总生存期的多个因素进行多因素分析。结果:1.在细胞培养实验中,显微镜下可见786-0及769-P肾癌细胞接种于蒸馏水后细胞体积迅速增大并破裂。随着渗透压的增加,肿瘤细胞增大的速度减慢,浸泡15min可以使对数期生长的786-0及769-P肾癌细胞完全涨裂;而生理盐水对两种肾癌细胞无明显细胞毒性作用,暴露15min,两种肾癌细胞的形态及数目无明显改变。2.再次培养实验中,769-P肾癌细胞系在蒸馏水暴露3min、5min后,再次培养-48h可见肾癌细胞生长,而暴露10min后,再次培养48h无细胞生长:而786-0肾癌细胞系在蒸馏水暴露5min后再培养48h,即无细胞生长。3.2010.01-2017.12因肾肿瘤自发破裂入院手术及术中肿瘤意外破裂患者34例,其中男21例,女13例,术中出血>500m有21(61.8%)人,术后病理结果显示,28例患者为透明细胞癌,非透明细胞癌6例,其中术中蒸馏水腹膜后冲洗患者18人,随访12-62个月,其中1例患者出现局部复发,1例患者肺转移,腹膜后生理盐水冲洗者16人,随访4-50个月,其中局部复发患者6例,肺转移2例,脑转移及肝转移各1例,单因素分析各相关因素对34例患者的无病生存期及总生存期的影响,Furman分级、术中出血量、术中应用蒸馏水浸泡与患者的疾病复发有关联,且术中出血>500ml、术中未应用蒸馏水浸泡预示着患者术后预后更差,总生存期更短。Cox模型多因素分析显示,Furman分级III、Iv级、术中出血>500ml、术中未应用蒸馏水浸泡是患者疾病复发的独立危险因素,而术中出血>500ml、术中未应用蒸馏水浸泡是影响患者总生存期的独立危险因素。术中是否应用蒸馏水腹膜后浸泡对患者生存期的长期随访结果显示,两组患者1年、3年、5年术后无病生存率为:100%、83.6%、62.7%和62.5%、11.1%、0%,P<0.001,有统计学意义,两组患者术后1年、3年、5年总生存率为:100%、90.9%、60.6%和100%、70.8%、0%,P=0.004,有统计学意义,蒸馏水冲洗组的无病生存期及总生存期明显高于生理盐水组患者。结论:1.蒸馏水所产生的低渗作用对786-0及769-P肾癌细胞具有杀伤作用,蒸馏水暴露15min可以完全引起肾癌细胞涨裂、溶解;2.在经腹膜后肾癌手术中,术中腹膜后蒸馏水冲洗可以明显降低肾肿瘤意外破裂患者术后肿瘤的复发率,提高患者的无病生存期及总生存期。
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