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研究背景:肿瘤流行病学资料显示,肝癌和肺癌是威胁人类健康与生命的恶性疾病,其发病率和死亡率极高。目前普遍采用的放化疗以及手术切除治疗,均存在敏感性较差,不能根治的缺点。因此,寻找有效的治疗方法是亟待解决的问题。塞来昔布(celecoxib)属于新一代非甾体类抗炎药物(nonsteroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs),大量的研究结果表明,塞来昔布具有潜在的抑制肿瘤发生、发展以及转移等作用。塞来昔布为环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)选择性抑制剂,通过抑制COX-2表达、降低前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)水平促进肿瘤细胞凋亡,而近年来人们还发现了一些COX-2非依赖的靶点,但是其抗肿瘤作用机制目前尚未完全阐明。研究目的:阐述塞来昔布对H22肝癌和Lewis肺癌的治疗作用及其作用机制,为其作为抗肿瘤药物的临床应用提供理论依据。研究内容:建立小鼠实体瘤模型后灌胃给药,计算肿瘤体积和重量,检测在体水平对肿瘤的抑制;MTT方法检测对肿瘤细胞增殖抑制作用;流式细胞仪手段检测肿瘤细胞凋亡和线粒体膜电位变化;Western blot方法检测细胞花生四烯酸(arachidonic acid,AA)代谢通路关键酶磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,cPLA2)和COX-2,线粒体凋亡通路关键蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 Associated X protein,Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF)、细胞色素c (cytochrome c,Cyto c)、半胱氨酸天冬氨酸酶-3(cysteine-aspartic proteases,caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸酶-9(cysteine-aspartic proteases,caspase-9),过氧化物酶体增殖物激活受体( peroxisome proliferator activated receptor,PPARγ),核因子-κB( nuclear factor kappa B,NF-κB)的表达;RT-PCR方法检测细胞中cPLA2和COX-2的mRNA转录情况,采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法检测24h细胞培养上清液AA水平的变化,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测24h细胞培养上清液PGE2水平的变化。研究结果:1、塞来昔布对H22肝癌抑制作用塞来昔布抑制H22肝癌细胞增殖及其移植瘤生长;高剂量塞来昔布抑制cPLA2和COX-2表达,增加AA和降低PEG2水平;低剂量塞来昔布增加cPLA2表达,对COX-2表达无影响,AA含量增高、对PEG2水平无影响;各剂量组塞来昔布均增加AA与PGE2比值;塞来昔布作用于线粒体凋亡途径,破坏线粒体膜,影响凋亡信号蛋白表达,促进肿瘤细胞凋亡;塞来昔布对PPARγ/NF-κB途径无影响。2、塞来昔布对Lewis肺癌抑制作用塞来昔布抑制Lewis肺癌移植瘤生长及细胞增殖;能够促进细胞凋亡、降低线粒体膜电位;塞来昔布抑制COX-2表达,增加cPLA2表达,提高AA含量,降低PEG2水平;各剂量组塞来昔布均增加AA与PGE2比值;塞来昔布作用于PPARγ/NF-κB途径,增加PPARγ表达,降低NF-κB表达。研究结论:塞来昔布对H22肝癌细胞及Lewis肺癌细胞花生四稀酸代谢途径关键酶及其产物调节不同,但均增加AA与PGE2比值;AA与PGE2比值可能反映非甾体抗炎药抗肿瘤作用;塞来昔布可能通过调节COX-2依赖及非依赖途径、激活线粒体凋亡通路,促进细胞凋亡,从而发挥抗H22肝癌作用;塞来昔布抗Lewis肺癌可能通过调节COX-2依赖途径及PPARγ/NF-κB途径,促进细胞凋亡实现。