艾灸足三里穴对脊髓横断后大鼠胃黏膜损伤修复机制的影响

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目的:为探讨艾灸足三里穴启动的内源性信息对胃黏膜的修复效应与脊髓的关系,本研究选择性地切断实验动物神经通路中的脊髓,应用组织形态学、生化及分子生物学等方法,观察艾灸对胃黏膜损伤的修复效应,并观察艾灸对胃黏膜保护相关内源性物质IL-1β、TNF-α、EGF、IL-4、PGE2、NO及修复蛋白HSP70表达的影响。方法:将48只SD大鼠随机分为4组,即:A、正常组;B、模型组;C、艾灸+模型组;D、艾灸+模型组+脊髓横断组,每组12只,先按照要求对D组的大鼠行脊髓横断手术,手术成功后,B、C、D组大鼠予以无水酒精及阿司匹林灌胃做成胃黏膜损伤模型(A组生理盐水灌胃),第四天以艾灸足三里穴为被试因素,进行艾灸处理(A、B组只绑不灸),每日 2次,连续3天。取血清及胃组织,按Guth标准记录大鼠胃黏膜损伤指数(UI),光镜下观察胃黏膜组织形态学变化;采用酶联免疫吸附法检测胃黏膜组织及血清中的IL-4、PGE2、NO含量;胃黏膜组织中EGF、血清中IL-1β、TNF-α的含量;采用蛋白质印迹法(Western-blot)检测胃黏膜组织中热休克蛋白70(HSP70)表达。结果:1.造模后,模型组大鼠胃黏膜损伤指数最高,正常组大鼠胃黏膜未见明显损伤,说明造模成功;艾灸治疗后,胃黏膜损伤大鼠的胃黏膜均有不同程度的修复,主要表现为胃黏膜损伤指数降低(P<0.01),胃黏膜上皮细胞脱落情况好转,排列较为整齐规则,胃黏膜上皮出现组织增生,胃腺细胞增殖,趋向正常,炎性细胞渐趋减少,毛细血管增生。2.脊髓横断后的艾灸治疗组胃黏膜损伤的保护效果差,胃黏膜损伤指数降低幅度较小(P<0.01,P<0.05),胃黏膜表面破损较严重,炎症细胞浸润较明显,细胞内可见充血。3.艾灸治疗有上调胃黏膜组织中EGF、血清IL-4、胃黏膜组织及血清中PGE2和PNO的含量以及降低血清IL-1β、TNF-α含量的作用。但此作用部分受到了脊髓横断术的影响(P<0.01,P<0.05)。4.经过艾灸治疗的大鼠胃黏膜组织中HSP70含量有明显上升(P<0.01,P<0.05);而艾灸+脊髓横断组与未经手术的艾灸治疗组胃黏膜组织中HSP70含量没有变化(P>0.05)。5.经过艾灸治疗的各组胃黏膜组织中HSP70表达模型组均有不同程度的上升(P<0.01,P<0.05),而艾灸+脊髓横断组较未经手术的艾灸治疗组胃黏膜组织中HSP70表达降低(P<0.01,P<0.05),模型对照组和正常对照组在此项指标上差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.艾灸足三里穴可明显改善胃黏膜损伤后大鼠胃黏膜组织形态,影响胃黏膜修复相关内源性物质含量及蛋白HSP70的表达,从而降低胃黏膜损伤程度。2.脊髓横断对艾灸足三里穴降低胃黏膜损伤修复机制有明显干扰。证明脊髓是艾灸足三里穴对胃黏膜损伤修复机制的重要信号传导途径,是其信号通路重要的一部分。
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