键合型高效液相色谱手性固定相的制备及其拆分性能研究

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随着科学技术的发展,人们对不同旋光性药物所表现出来的不同的生理活性这一现象的认识更加深入。在生物化学、药物化学及有机化学中的不对称合成和催化技术中,旋光异构体的分离与分析显得越来越重要。在众多的旋光异构体的分离与分析方法中,高效液相色谱手性固定相(HPLC-CSP)直接拆分是一种快速、便捷且有发展潜力的方法之一。由于键合型固定相的稳定性优于涂敷型固定相,因此,本文所研究的CSPs都是键合型的。在查阅、分析和总结国内外大量的高效液相色谱手性分离文献的基础上,我们制备了七种新的CSPs;根据所键合手性选择剂的种类,大致可将它们分为以下三类,即环糊精类CSPs、大环抗生素类CSPs和生物碱类CSP(刷型CSP)。具体的工作如下:(1)合成了三种(L)-DNP-氨基酸修饰的β-CD CSPs,即(L)-DNP-丙氨酰化β-CD CSP、(L)-DNP-苯丙氨酰化β-CD CSP和(L)-DNP-缬氨酰化β-CD CSP,并以尼莫地平、氯胺酮、扑尔敏等9种手性化合物为测试样品对它们的手性拆分性能进行了系统的研究。结果表明,(L)-DNP-缬氨酰化β-CD CSP的分离能力最强,而(L)-DNP-丙氨酰化β-CD CSP的分离能力最差。在(L)-DNP-丙氨酰化β-CD CSP上分离了尼莫地平和维拉帕米,它们的分离因子α分别是5.77和2.11,相应的分离度Rs分别是0.79和0.37;在(L)-DNP-苯丙氨酰化β-CD CSP上分离了苯丙醇胺、1,1’-联-2-萘酚、阿替洛尔、扑尔敏和维拉帕米,它们的分离因子α分别是16.98、1.34、3.47、2.53和2.38,相应的分离度Rs分别是0.50、0.43、0.20、0.26和0.17;在(L)-DNP-缬氨酰化β-CD CSP上分离了异丙嗪、扑而敏、苯丙醇胺、普萘洛尔、氯胺酮和1,1’-联-2-萘酚,它们的分离因子α分别是1.36、1.75、2.96、1.75、3.81和1.84,相应的分离度Rs分别是0.66、0.59、0.90、0.52、0.82和0.14。最后,我们对拆分机理进行了分析,得到了可能的结果,即包合作用仍然是该类CSPs拆分外消旋体的主导力,但是,有数据显示,(L)-DNP-氨基酸部分也参与了拆分过程。(2)合成了利福平-红霉素混合型CSP,同时制备了利福平CSP和红霉素CSP,并以普萘洛尔等9种手性化合物为测试样品对其手性拆分性能进行了系统研究。在最佳分离条件下,尼莫地平、异丙嗪、扑尔敏、普萘洛尔、阿替洛尔和1,1’-联-2-萘酚在混合型CSP上实现了分离,它们的的分离因子α分别是2.14、1.90、1.87、1.69、1.38和1.59,相应的分离度Rs分别是0.10、0.33、0.12、0.70、0.66和0.14。结果表明,协同效应在混合型CSP拆分外消旋体的过程中扮演了重要的角色。(3)合成了键合偶联双奎宁CSP,并以扑尔敏等5种手性化合物为测试样品对其手性拆分性能进行了系统研究。在最佳分离条件下,扑尔敏、1,1′-联-2-萘酚、异丙嗪和普萘洛尔的分离因子α分别是3.08、3.09、1.43和1.16,相应的分离度Rs分别是1.87、0.73、0.54和0.29。另外,通过分析偶联双奎宁的结构,并结合分离数据,我们发现并且证明,手性选择剂结构的刚性能够增加对对映体的选择性。
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