嗜酸乳杆菌对抗生素诱导小鼠肠道菌群失调的调整作用

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长期大量使用广谱抗生素最直接、最常见的并发症就是肠道菌群失调,并由此导致腹泻或肠道感染已是不争的事实,临床上抗生素相关性腹泻(AAD)已十分普遍。目前微生态制剂作为新型治疗手段已广泛用于因肠道菌群失调引起急慢性腹泻的治疗,其根本目的在于恢复和稳定原有的微生态平衡。而具体对因抗生素诱导的肠道菌群失调具有调整作用的微生态制剂缺乏且研究报道不一致。“培菲康”是一种新型的微生态制剂,有双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和粪链球菌组成。其中嗜酸乳杆菌已有研究证明其具有耐酸、耐胆盐、黏附及定植抗性等优良的生物学特性。但是,它对抗生素诱导的肠道菌群失调是否具有调节作用目前还未见报道。人和动物肠道附植着大量的微生物,形成复杂而动态平衡的微生态区系。由于传统的微生物技术只能分析可培养的微生物,在研究肠道微生物生态系统时难免存在不可逾越的缺陷和不足。所以,要准确评价益生菌制剂对肠道菌群的调节功能还需其它方法的补充。基于16S rRNA基因的变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术具有直观、快速和高通量的优点,能有效反映复杂微生物区系全貌,适合于分析复杂的微生物菌群,而且目前已被应用于肠道微生态相关研究。本实验以自“培菲康”产品分离的嗜酸乳杆菌为目标益生菌,通过连续5天大剂量抗生素头孢曲松处理SPF级BALB/c小鼠建立肠道菌群失调动物模型,运用现代分子生物学PCR-DGGE结合传统培养法观察和分析了此目标菌株对肠道菌群失调的调整作用。结果:(一)肠道菌群失调动物模型的制备:连续5天大剂量抗生素头孢曲松使肠道细菌乳杆菌、双歧杆菌、肠杆菌及肠球菌数量均下降,且停用抗生素一周内各检测菌数量未能恢复正常,与正常对照组相比,具有极显著性差异(P<0.01),模型制备成功;(二)嗜酸乳杆菌对肠道菌群失调的调节作用:在成功制备动物模型基础上,嗜酸乳杆菌治疗组乳杆菌、双歧杆菌有较明显的恢复,肠杆菌数量虽也有所恢复但增长幅度不及乳杆菌和双歧杆菌,而异常增殖的肠球菌数量有所下降;DGGE图谱分析表明,各处理组具有一定程度的相似性并聚为一族,治疗组菌群多样性指数与自然恢复组相比,具有极显著性差异;同时治疗组体重、日摄食量等表观指标也均较自然恢复组要大。实验结果证实:此分离的商品化嗜酸乳杆菌对抗生素诱导肠道菌群失调具有一定的调节作用,“培菲康”具有拓展适应症的可能性。
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