前言 凝血功能紊乱与冠心病的发生发展密切相关，冠心病患者大多存在凝血功能增强及纤溶活力受抑，粥样斑块的破裂和血栓形成是急性心肌梗死和不稳定性心绞痛的主要病理生理变化，凝血因子及抗纤溶物质对粥样斑块的形成和发展具有重要意义。 凝血因子XIII(FXIII)又称为纤维稳定因子，它的活性组分子FXIII A具有转谷氨酰胺酶活性。它在血浆中的形态是以2个A亚基和2个B亚基构成的四聚体，而在细胞中只有A亚基的二聚体。FXIII由凝血酶在Arg37和Gly38之间裂解而活化。活化的FXIII可催化纤维蛋白γ和α链的共价交联，增加纤维蛋白的力学强度及其对纤溶酶的耐受性。 近年研究发现FXIII基因的2号外显子第34号密码子发生的G→T的点突变(FXIIIVal34Leu)对静脉血栓形成有对抗作用，对出血性疾病有促进作用。可能的机制为FXIII34Leu所促使形成的纤维蛋白凝块的质量／长度比率减低，从而影响了纤维蛋白凝块的结构，导致纤维蛋白的无效交联或缺乏其他因子的交联，从而起到保护作用。 2洲3浙江人学帧0：学N沦义 目前FXlllVal34Leu基因多态性与静脉血栓的关系 of4介欧艾人种小破证实，但其与动脉血柞的关系尚有争议。＊洲人种儿几汉肮人们小泊从山突变与冠心病的关系的研究尚少。本研究运川聚介酶链反应一。’n．饥构像吝态性技术（polymerase chain reaction－single strand conformatlonalpolymorphism，PCR一SSCP）检坝FXI！IVa！34Leu 4囚多态卜；，以川 了解FXlllVal34Leu基因多态性在汉族人群中的分血情况，并探讨其fi Jd心汕及心肌梗死的关系。材料与 方 法一、研究对象： 398例相互无血缘关系的中囚汉族人。冠心汕组19引川y154例，丈4！例，平均年龄（64．25士9．43）岁］，为浙江大学医学院附属二院心内科仆I况病人，全部经冠状动脉造影证实。冠状动脉病变以全少一支上要］血竹1’门？狭窄程度 3 50％为阳性。并根据 WHO关于心肌梗死的诊断标准分为心肌砂死组（87例）禾非心肌梗歹组（108例）。对照组203例［男145 例，女58例，平均年龄（6Z．54土8．77）岁］，为冠状动脉造影正常者及门诊健康体检K，经严格病史询问无冠心病和心肌梗死病史，心电图正常。二、方法：1．一般临床资料的收集：所有受试者均详细询问有无高血压、糖尿病、高脂血症、吸烟史、并测定身高、体重及部分生化指标。2．F＊111＊。134＊eu基囚型分析：采用P＊R一SS＊P技术。（1）引物设计’J合成：参照 KOhl盯和 K。figS8dsl。ip引提出的引物，山上海生物＊（ 公…合成，引物序列：上游引物5’－＊＊C＊＊T＊＊A＊＊C＊＊A＊＊A＊＊G＊O3’：卜游引物5’－TAC CTT GCA GGT TGA CGC CCC GGG GCA CTA－3’。（2）提取模板ONA：E＊＊A抗I疑周m；狰脉W，酚／氯M沾提取DNA。（3）rCR扩增：反应体系25u卜义小火 10X PCR缓冲液2．5 u卜 MgCIZ！～3umol／L，dNTP 2 2003 o门IW人学＊叶，川寸沦义各200u——1儿，模板＊N＊0．lug，＊＊酶ZU，卜卜游引物各10p——1。打增条什：94aC预变性smin，94OC变性30see，53OC退火30see，72C延仰 30see，30个循环后，72℃延伸 smin。（4）SSCP分析：非变性聚丙烯酚胺凝）饺浓度为 12％（29：二），其中含5％甘油；采用碱变性法使双链变为单链；以澳化乙锭（ethidium bromide，EB）染色，在UV凝胶成像仪下检测并摄像分析。三、统计学分析： 采用SPSs10刀统计软件包进行统汁学分析。一般临床资料。1。i！V资料均采用均数士标准差（歹上S）表示，组间统计学差异用t检验，计数资料织Dh］统计学差异用才检验。基囚型和等位基因频率采用直接计数法统i！－，织D）；］比较采用X’检验，研究对象与Hardyweinberg平衡的符合程度也采川X‘扮验。以尸＜0刀5为统计学差异有显著性。结 果一、一般临床资料和冠心病危险因素： 年龄、性别、体重指数、糖尿病例数、高血压病例数在两组MD计均无显著性（P＞0．05），高脂血症和吸烟在冠心病组中的例数较对照组壮甚增加（P＜0．001）。h、FXlllVal34Leu基因多态性的总体分布： FXlllVal34Leu基因多态性扩增片段大小为151hp。本研究398例样本小，未发现Leu／Leu基因型，检狈到Val／Val基因型379例，Val／Leu基H 型19 例，丛因型频率分别为 95．2％和 4．8％，Val，Leu等位基因频率分别为 97．6％和 2．4％。三、冠心病组和对照组FXlllVal34Leu基囚多态性分伽的比较： 冠心9，5织V。1／＊。1块H呗186例，V。1儿eu从闪刑9例，从＊则帧个分别为95．4％、4．6％；对照纠口Va！／Va！从厂则193例，V川／LcU）．【！人1个10M，基囚型频率分别为95．1％，4．9％。经 ＊ 检验门d心俩纠和对照纠均达判