缺血/再灌注大鼠脑内轴突生长抑制因子受体NgR的表达及其干预的实验研究

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目的中枢神经系统(central nervous system, CNS)损伤后轴突不能再生的主要原因是由于髓鞘抑制因子的存在,目前已经发现的抑制蛋白有Nogo-A、髓鞘相关糖蛋白(myelin associated glycoprotein,MAG)和少突胶质细胞-髓鞘糖蛋白(oligodendrocyte-myelin glycoprotein,OMgp),三者拥有一个共同的受体(Nogo-66 receptor,NgR)。NgR是一种和糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)相连接的轴突表面蛋白,它和三种抑制因子结合后,通过跨膜的协同受体P75将抑制性信号传导至细胞内,从而限制轴突的再生。以前的研究发现电刺激小脑顶核可以保护脑组织免受缺血性损伤。本课题的研究目的就是探索在大鼠局灶性脑缺血后的不同时间点,NgR在缺血侧皮质及海马的表达情况及表达规律,以及电刺激小脑顶核(electrostimulation of fastigial nucleu,FNS)对缺血后脑皮质和海马中NgR表达的影响和意义。方法成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠96只,采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(middle cerebral artery occlusion, MCAO)/再灌注模型,随机分为6组,分别为假手术组、再灌注后12h、24h、1w、2w、3w组,然后通过HE染色进行病理观察神经元细胞的形态,逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测NgR mRNA的表达情况,免疫组织化学的方法检测NgR蛋白及轴突的生长状况。再取成年雄性SD大鼠72只建立模型,随机分为假手术组(对照组)、单纯缺血/再灌注组(模型组)和缺血/再灌注+电刺激小脑顶核组(FNS干预组)。FNS处理组在缺血2h后再灌注时立即给予电刺激小脑顶核1h,在第24h和2w时观察和上述相同的指标。结果NgR的表达在缺血/再灌注24h和2w增加最明显,和单纯缺血/再灌注组相比,FNS干预组NgR表达显著降低,轴突损伤及再生情况有所改善。结论FNS干预能明显下调缺血再灌注大鼠缺血区皮质及海马的NgR表达,对改善轴突的损伤及再生状况提供了新策略。
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