Leber 遗传性视神经病变(Leber hereditary optic neuropathy,LHON)系一种主要累及视盘黄斑束纤维，导致视神经退行性变的遗传性疾病。LHON的遗传特征为母系遗传。该病主要表现为急性或亚急性双侧中心视力丧失、视神经萎缩。患者发病年龄一般在18-30岁之间，男性患者明显多于女性患者。目前，mtDNA点突变被认为是LHON的特异性改变，国内外有关LHON的mtDNA突变的报道共涉及25个位点，其中原发突变 超过5种，大多数突变位于编码NADH脱氢酶亚单位的区域内，最常见的有11778/ ND4（G→A）、14484/ ND 6（T→C）和3460/ ND1（G→A）。1988年，Wallace首先发现mtDNA第11778核苷酸G→A突变，造成第340位氨基酸由精氨酸变为组氨酸。1991年，Huoponen等首先在LHON患者的mtDNA中发现了ND1亚单位第 3460核苷酸发生突变（G→A），导致苏氨酸替代丙氨酸。1992年，Johns等首先在LHON患者的mtDNA中发现了ND6亚单位第14484核苷酸发生突变（T→C），导致缬氨酸替代蛋氨酸。除此之外，在ND6亚单位上还检测到6个核苷酸突变，它们是14459（G→A）、14482（C→G）、14495（A→G）、14498（T→C）、14568（C→T）及14596（A→T）。可见ND6亚单位是LHON的突变热点。超过95%的LHON患者的发病<WP=37>主要是第11778、14484和3460这三个mtDNA核苷酸之一发生突变的结果，其中第11778核苷酸突变约占全部的50-52%。除以上核苷酸突变外，其它核苷酸突变被称为继发突变。单一核苷酸的突变可导致LHON，两个核苷酸同时突变也可存在于LHON患者的mtDNA中。由此认为，LHON也可有多重突变同时发生，当然也包括细胞核内基因组。本研究采用PCR-限制性核酸内切酶酶谱分析法，针对一个临床上疑似Leber遗传性视神经病变的家系进行三个mtDNA核苷酸(3460、11778、14484)的突变检测，观察是否有mtDNA突变的存在，以明确对该家系成员的诊断。在收集家系成员的详细资料后，采集家系成员的血样标本，提取外周血中的白细胞，提取总DNA，应用Pcrdesn软件系统设计扩增包括mtDNA的第3460、11778、14484位核苷酸的三对PCR引物，PCR扩增产物分别用三种限制性核酸内切酶（HinI 1,SfaN 1及Sau3A 1）酶解，进行酶谱分析。结果发现该家系成员存在着mtDNA的ND4亚单位第11778核苷酸突变。根据该家系的家族史、患者的临床表现及各项辅助检查，并通过分子生物学技术检测到了ND4亚单位第11778核苷酸突变的存在，证明该家系成员所患疾病为Leber 遗传性视神经病变，而且mtDNA第11778核苷酸突变是该家系患者的发病原因。该家系患病成员的特点是：①明确的家族发病史，家系成员<WP=38>发病情况符合母系遗传的特征。②该家系患者临床表现及辅助检查符合Leber 遗传性视神经病变的改变。③本实验检测到该家系成员mtDNA的第11778核苷酸突变存在。④单一核苷酸的突变可导致LHON。应用PCR-限制性核酸内切酶酶谱分析法对LHON患者进行mtDNA点突变的检测是常用检测方法，为LHON的诊断提供了理论依据和技术方法；为散发的视神经炎、家族性视神经病变和可疑的LHON病例的诊断和鉴别诊断提供了依据；为LHON的治疗提供了理论依据和研究方向；可用于估计家系患者的视力预后以及为家系成员提供遗传咨询。